ヘム生合成異常による病態の分子機構:鉄芽球性貧血および骨髄性プロトポルフィリン症

血红素生物合成异常引起的病理分子机制：铁粒幼细胞性贫血和髓样原卟啉症

• 批准号: 05253201
• 负责人: 林 典夫
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05253201/
• 关键词: 5-アミノレブリン酸合成酵素; フェロキラターゼ; 骨髄性プロトポルフィリン症; 鉄芽球性貧血; 遺伝子

5-アミノレブリン酸合成酵素(ALAS)異常と関連があるとされる鉄芽球性貧血とフェロキラターゼ異常が原因とされる骨髄性プロトポルフィリン症について、、病因解明と治療法の開発に資することを目的として、遺伝子レベルでの病態解析を行なった。先ず赤血球型(ALAS-E)と非特異型(ALAS-N)のALASイソ酵素およびフェロキラターゼの遺伝子について生化学的、分子・細胞生物学的研究を進め、これによって得られた様々な知見に基づき、これら酵素遺伝子異常の解析を行った。その結果、以下の様な日本人患者についての最初の成果が得られた。1)骨髄性プロトポルフィリン症におけるフェロキラターゼ遺伝子変異の解析:昨年度までに、米国白人1例、次いで日本人2例につき、EBウイルスで株化したリンパ球を材料としてフェロキラターゼ遺伝子変異を解析し、第1例については既に報告した。本年度は、前年よりの日本人症例の解析をさらに進め、本酵素遺伝子の変異を確認した。即ち、第1例ではイントロン9、第2例ではイントロン7の5'端(供与部位)の塩基にG→A変異があり、異常スプライシングにより、それぞれエキソン9、エキソン7が欠失したmRNAが作られていた。2)鉄芽球性貧血におけるALA合成酵素異常の解析:前年度に引続き、日本人X-染色体連関性鉄芽球性貧血患者)1例のEBウイルス株化リンパ球を材料として、ALAS-E遺伝子の変異を検索した。即ち、ALAS-E遺伝子の各エキソン附近をPCR法により増幅し、解析を行ったところ、第5エキソン内に点変異A→T(Asp→Val)が見出された。しかし、本点変異を持つALASを大腸菌に発現させ、同様に発現させた正常ALASと酵素活性を比較したところ、著しい差異はないように思われた。ピリドキサールリン酸結合部位付近や各エキソン-イントロン境界領域等には変異は検出されなかったことから、5'調節領域の異常の可能性を含め、今後さらには幅広い解析が必要である。

5-ALAS abnormality, association, cause, etiology, development of therapy, purpose, and pathology analysis of ferritic anemia. ALAS-E and ALAS-N ALAS-E ALAS-N ALAS-E and ALAS-E ALAS-E A As a result, the following results were obtained in Japanese patients. 1)Analysis of genetic variation of bone marrow disease: last year, 1 case of white American, 2 cases of Japanese, EB disease of plant and ball, analysis of genetic variation of bone marrow disease, 1 case of Chinese, 2 cases of Japanese. This year, the analysis of Japanese cases in the past year has been improved, and the differences in the enzyme gene have been confirmed. In other words, in the first example, the 5'end (donor site) of the gene 7 is G→A. In the second example, the gene 7 is G→A. 2)Analysis of ALA synthase abnormality in iron bud anemia: In the previous year, a Japanese patient with X-chromosome-related iron bud anemia was reported. That is, ALAS-E gene in the vicinity of each of the three points PCR method to increase the amplitude, analysis of the line, the fifth point in the difference A→T(Asp→Val) The difference between ALAS and E. coli was detected and the difference between ALAS and E. coli was detected and the difference between ALAS and E. coli was detected. The possibility of abnormality in the 5'regulatory domain is included in the analysis of the future amplitude.

项目成果

Nakahashi,Y.et al.: "Human erythropoletic protoporphyria:Identification of a mutation at the splice donor site of intron 7 causing exon 7 skipping of the ferrochelatase gene" Hum.Mol.Genet.2. 1969-1970 (1993)

Nakahashi,Y.et al.：“人红细胞生成性原卟啉症：鉴定内含子 7 剪接供体位点的突变导致铁螯合酶基因外显子 7 跳跃”Hum.Mol.Genet.2。

Nakahashi,Y.et al.: "Molecular defect in human erythropoietic protoporphyria with fatal liver failure" Hum.Genet.91. 303-306 (1993)

Nakahashi,Y.et al.：“人类红细胞生成性原卟啉症的分子缺陷导致致命性肝功能衰竭”Hum.Genet.91。

Igarashi,K.et al.: "Regulation of transcription by dimerization of erythroid factor NF-E2 p45 with small Maf proteins" Nature. 367. 568-572 (1993)

Igarashi,K.et al.：“红系因子 NF-E2 p45 与小 Maf 蛋白二聚化调节转录”，Nature。

Yomogida,K.et al.: "Structure and expression of the gene encoding rat nonspecific form δ-aminolevulinate synthase" J.Biochem.113. 364-371 (1993)

Yomogida，K.等人：“编码大鼠非特异性形式δ-氨基乙酰丙酸合酶的基因的结构和表达”J.Biochem.113(1993)。

Munakata,H.et al.: "Purification and structure of rat erythroid-specific δ-aminolevulinate synthase" J.Biochem.114. 103-111 (1993)

Munakata，H.等人：“大鼠红细胞特异性δ-氨基乙酰丙酸合酶的纯化和结构”J.Biochem.114(1993)。