血球分化に関与する転写因子群の解析とその造血細胞腫瘍診断への応用

血细胞分化相关转录因子分析及其在造血细胞肿瘤诊断中的应用

• 批准号: 08266204
• 负责人: 林 典夫
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266204/
• 关键词: 転写因子; GATA-2; プロモーター; 造血細胞

転写因子GATA-2は造血幹細胞および各系列の前駆細胞で発現され、未分化血液細胞において重要な役割を果たしている。血球分化が開始されるとGATA-2の発現は抑制されてくる。従って、GATA-2遺伝子発現の調節は細胞が造血幹細胞や前駆細胞であるための機構と密接に関連している。血液細胞におけるこのようなGATA-2遺伝子発現の調節機構を解明するため、マウスGATA-2遺伝子の5'調節領域の解析を試み、以下のような成果を得た。1)マウスGATA-2遺伝子全体および5'隣接領域を含むクローンを単離し、GATA-2発現調節には2ヶ所のプロモータが働いていることを明らかにした。下流側のプロモータIbは既報のヒトおよびアフリカツメガエルのGATA-2プロモーターと相同のものであるが、上流側のプロモーターIaは本研究で新たに見出されたものである。2)プロモーターIaは造血系細胞および胎児脳におけるGATA-2発現を特異的に活性化する。特に、肝造血期のマウス胎児肝やIin^-Sca-1^+c-kit^+のマウス骨髄細胞ではIaエキソンのみが検出され、造血幹細胞や造血前駆細胞では主にIaプロモーターがつかわれていることが知られている。3)Iaプロモーター活性に関与するシス因子の同定およびその機能解析の結果、Iaプロモータの転写開始点(+1)の上流-79〜-61の領域が細胞系列特異的なIaプロモータ活性に関与することが知られた。DNase 1フットプリンディング実験により、GATA-2発現陽性のP815肥満細胞株の各抽出液ではこの領域に結合するタンパク質が見出された。GATA-2 mRNAをほとんど発現していないマウス赤白血病細胞の核抽出液では、そのような結合タンパク質が検出されなかった。さらに、ゲル移動度シフト法により、この領域に結合するいくつかの未知のタンパク質が検出され、これらのタンパク質間の複雑な相互作用の存在が、変異導入遺伝子による解析などから示唆された。

The gene GATA-2 plays an important role in the development of hematopoietic stem cells and various types of precursor cells, and in the development of undifferentiated blood cells. The development of GATA-2 was inhibited during the initiation of hemocyte differentiation. However, the regulation of GATA-2 gene expression is related to the structure and close connection between hematopoietic stem cells and progenitor cells. The regulatory mechanism of GATA-2 gene expression in blood cells was analyzed. The 5'regulatory domain of GATA-2 gene expression was analyzed. The following results were obtained. 1) It is clear that the entire GATA-2 genetic code and the 5'adjacent area will be separated, and the GATA-2 development and adjustment will be able to be implemented in the 2-station platform. GATA-2 is the same as the downstream side, and the upstream side is new to this study. 2) GATA-2 is specifically activated in hematopoietic cells and fetuses. In particular, the hematopoietic phase of the liver is characterized by fetal liver, Iin^-Sca-1^+c-kit^+, bone marrow cells, hematopoietic stem cells, and hematopoietic progenitor cells. 3) The results of functional analysis of the isostatic factors related to Ia profile activity and Ia profile start point (+1) and the domain of-79 ~-61 upstream of Ia profile start point are known as the cell series-specific Ia profile activity. The DNase 1 gene expression and GATA-2 gene expression were detected in the extracts of P815 cell lines. GATA-2 mRNA is expressed in nuclear extracts from leukemic cells. In addition, the mobility method is used to analyze and analyze the interaction between the unknown substances and the complex substances.

项目成果

Nagai, Mayumi: "Novel regulation of δ-aminolevulinate synthase in the rat Harderian gland" Biochem. Pharmacol.印刷中. (1997)

Nagai，Mayumi：“大鼠哈德里安腺中 δ-氨基乙酰丙酸合酶的新调节”Biochem，出版中。

Onodera, Ko: "Comserved structure, regulatory elements, and transcriptional regulation from the GATA-1 gene testis promoter" J. Biochem. 121・2. 251-263 (1997)

Onodera, Ko：“GATA-1 基因睾丸启动子的保守结构、调控元件和转录调控”J. Biochem. 121・2 (1997)。

Oyake, Tatsuya: "Bach proteins belong to a novel family of BTB-basic leucine zipper transcription factors that interact with MafK and regulate transcription through the NF-E2 site" Mol. Cell. Biol.16・11. 6083-6095 (1996)

Oyake, Tatsuya：“Bach 蛋白属于 BTB 碱性亮氨酸拉链转录因子家族，可与 MafK 相互作用并通过 NF-E2 位点调节转录”Mol.16·11 (1996)。

Nagai, Tadashi: "5-Aminolevulinate synthase expression and hemoglobin systhesis in a human myelogenous leukemia cell line" J. Biochem. 121・3. 487-495 (1997)

Nagai，Tadashi：“人骨髓性白血病细胞系中的 5-氨基乙酰丙酸合酶表达和血红蛋白合成”J. Biochem 121・3（1997）。

Minegishi, Naoko: "Expression of GATA transcription factors in myelogenous and lymphoblastic leukemia cells" Int. J. Hematol.印刷中. (1997)

Minegishi, Naoko：“GATA 转录因子在骨髓和淋巴细胞白血病细胞中的表达”，Int. J. Hematol，出版中。