組換え受容体を用いた逆作用薬inverse agonistの検索

使用重组受体寻找反向激动剂

• 批准号: 10169219
• 负责人: 村松 郁延
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169219/
• 关键词: α_1アドレナリン受容体; 逆作用薬; inverse agonist; 中性拮抗薬; neutral antagonist; upregulation

ヒトα_<1a>アドレナリン受容体の第3細胞内ループにアミノ酸変異(271A1a/Thr)を導入したconstitutive active mutantを用いて,inverse agonist,neutral antagonistを検索し,以下の結果を得た。1. 変異α_<1a>アドレナリン受容体はnoradrenalineなどagonistに対し野生型より約10倍高い親和性を示した。しかし,prazosinやKMD-3213などのantagonistに対する親和性には変化を認めなかった。2. 変異受容体を発現したCHO細胞のIP3産生能はagonistを処置しなくても持続的に上昇していた。そして,この上昇はprazosinで抑制されたが,KMD-3213は影響せず,むしろprazosin作用に拮抗した。3. 細胞の代謝状態を細胞近傍外液の酸性化率を指標に検出できるcytosensorを用いて調べたところ,prazosinは変異型のベースの酸性化率を低下させた。しかし,KMD-3213はベースの酸性化率に影響せず,parazosinの作用を遮断した。4. parazosinなどのantagonistを培養培地中に加えておくことにより,変異型では著明な受容体密度の上昇(upregulation)を引き起こした。これに対し,KMD-3213はupregulationを惹起せず,prazosinによるupregulationを抑制した。5. 以上の結果より,α_<1a>アドレナリン受容体のantagonistにはprazosinのようなinverse agonistと,KMD-3213のようなneutral antagonistが存在すること,前者の解析にはconstitutive active mutantが有用であることが明らかとなった。

In the third chapter of the lt;1a> test, the receptor was loaded with intracellular acid (271A1a/Thr), which was injected into the constitutive active mutant and inverse agonist,neutral antagonist. The following results were obtained. 1. The recipient is noradrenaline, agonist, wild type, about 10 times taller, and sexual. In addition, prazosinKMD-3213 is used to treat antagonist and sexual diseases. two。 The receptive body shows that the CHO cell IP3 generates energy, the agonist cell sets the power supply, and the receiver holds the energy supply. Prazosin inhibition, KMD-3213 inhibition, prazosin antagonism, and so on. 3. The acidifying rate of the extracellular fluid near the extracellular fluid means that the acidifying rate is lower than that of the cytosensor, and the acidifying rate of the cell is lower than that of the cytosensor. The acidification rate has a negative effect on the acidification rate, and the effect of parazosin on the acidification rate is similar to that of KMD-3213. 4. Parazosin to increase the volume density (upregulation) of the capacitive bulk density in the culture ground. The KMD-3213 upregulation caused a lot of trouble, and the prazosin caused the upregulation to suppress it. 5. The results of the above results show that the recipients of α _ & lt;1a> are sensitive to antagonist, prazosin, inverse agonist, and KMD-3213 to neutral antagonist, while the former is useful to analyze constitutive active mutant.

项目成果

I.Muramatsu, S.Murata, M.Isaka, et al.: "α_1-Adrenoceptor subtypes and two receptor systems in vascular tissues." Life Science. 62(17/18). 1461-1465 (1998)

I.Muramatsu、S.Murata、M.Isaka 等：“血管组织中的 α_1-肾上腺素受体亚型和两种受体系统。” 62(17/18) 1461-1465 (1998)。

S.Nakamura, T.Taniguchi, F.Suzuki, et al.: "Evaluation of α_1-adrenoceptors in the rabbit iris : pharmacological characterization and expression of mRNA." British Journal of Pharmacology. (in press). (1999)

S.Nakamura、T.Taniguchi、F.Suzuki 等人：“兔虹膜中 α_1-肾上腺素受体的评估：mRNA 的药理学特征和表达”（出版中）。

M.Takahashi, T.Taniguchi, S.Murata, et al.: "New α_1-adrenoceptor antagonist, JTH-601, shows more than 10 times higher affinity for human prostates than arteries." Journal of Urology. 161 in press. (1999)

M.Takahashi、T.Taniguchi、S.Murata 等人：“新型 α_1-肾上腺素受体拮抗剂 JTH-601 对人类前列腺的亲和力比《泌尿学杂志》161 的亲和力高 10 倍。” 1999）

Y.Hiraoka, T.taniguchi & I.Muramatsu: "Binding and functional characterization of α_1-adrenoceptor subtypes in the rat prostate." European Journal of Pharmacology. 366. 119-126 (1999)

Y.Hiraoka、T.taniguchi 和 I.Muramatsu：“大鼠前列腺中 α_1-肾上腺素受体亚型的结合和功能特征。欧洲药理学杂志”366. 119-126 (1999)