脳スライスからの高感度神経伝達物質遊離測定法の開発と中枢神経薬理学への応用

开发测量脑切片神经递质释放的高灵敏度方法及其在中枢神经系统药理学中的应用

• 批准号: 21659062
• 负责人: 村松 郁延
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659062/
• 关键词: 薬理学; 脳・神経; 神経科学; 神経伝達物質; 脳スライス; 表面還流法

脆弱な脳神経組織からの伝達物質遊離を検討する方法として、脳組織を低酸素状態にすることなく長時間生存させることのできる超微量表面還流装置を開発した。今年度はこの装置を用い、^3H-dopamineを取り込ませたラット線条体スライス標本に対する電気刺激およびニコチンの影響を調べた。電気刺激を20秒間、10分間隔で繰り返し与えたところ、きわめて再現性のある一過性の^3H-dopamine遊離が30分以上にわたって観察された。また、10nM以上のニコチンを30秒間10分間隔で還流したところ、ニコチンの濃度に依存した一過性の^3H-dopamine遊離も観察された。電気刺激による遊離は、tetrodotoxinで消失したが、ニコチンによる遊離は抑制されなかった。また、ニコチンによる^3H-dopamine遊離は、持続的にニコチンを還流することにより急速に減少し、その後、高濃度のニコチンを作用させても反応しなくなるなど著しい耐性を示した。ニコチンによる遊離は、ニコチン受容体遮断薬や全身麻酔薬などで抑制されたが、電気刺激による遊離は、全く影響を受けなかった。^3H-epibatidineを用いた結合実験で、全身麻酔薬はニコチン受容体のァゴニスト結合に全く影響しなかった。したがって、全身麻酔薬はアゴニスト結合部位に影響することなく、ニコチン受容体にアロステリックに結合してニコチン受容体機能を抑制すると考えられた。今後は、さらに検討を進め、脳神経組織に対する各種作用薬の薬理メカニズムを解明していきたい。

Methods for detecting the release of substances from fragile tissues and developing ultra-micro surface flow-back devices for long-term survival of tissues in a low-acid state This year, the device uses H-dopamine to modulate the effects of electrical stimulation on the line. The electrical stimulation was repeated for 20 seconds and 10 minutes, and the H-dopamine release was observed for more than 30 minutes. The concentration of H-dopamine above 10nM is dependent on the transient detection of H-dopamine in 10-minute intervals over 30 seconds The electrical stimulation causes free and tetrotoxin to disappear and free and inhibit. H-dopamine is free, persistent, and reactive. It decreases rapidly, increases in concentration, and increases in tolerance.ニコチンによる游离は、ニコチン受容体遮断薬や全身麻酔薬などで抑制されたが、电気刺激による游离は、全く影响を受けなかった。^ 3H-epibatidine is used in combination with the whole body to prevent and treat paralysis. For example, the whole body anesthesia can inhibit the function of the receptor by inhibiting the binding site of the receptor In the future, we will continue to discuss the role of various factors in the organization of the brain.

项目成果

Assessment of novel muscarinic acetylcholine receptors in rat cerebral cortex by a tissue segment binding method

通过组织片段结合法评估大鼠大脑皮层中新型毒蕈碱乙酰胆碱受体

• 发表时间: 2010
• 期刊: J Pharmacol.Sci. 112
• 作者: Lee K-S.;Nishimune A.;Yoshiki H.;Anisuzzaman ASM;Suzuki F.;Wang M-H;Cheng J-T;Muramatsu I.
• 通讯作者: Muramatsu I.

Evaluation of β_<1L> -adrenoceptors in rabbit heart by tissue segment binding assay.

通过组织片段结合测定评估兔心脏中的β_<1L>-肾上腺素受体。

• 发表时间: 2009
• 期刊: J.Pharmacol.Sci. 110
• 作者: Yoshiki H.;Nishimune A.;Suzuki F.;Morishima S.;Ikeda T.;Sasaki M.;Audigane L.M.;Gauthier C.;Muramatsu I.
• 通讯作者: Muramatsu I.

α1Lアドレナリン受容体安定発現株の樹立

α1L肾上腺素受体稳定表达菌株的建立

• 发表时间: 2010
• 作者: 柴加奈子;影山晴秋;野中直子;竹ノ谷文子;塩田清二;村松郁延
• 通讯作者: 村松郁延

ウサギ虹彩散大筋α1L-アドレナリン受容体サブタイプ

兔虹膜扩张肌α1L-肾上腺素能受体亚型

• 发表时间: 2009
• 作者: 影山晴秋;竹ノ谷文子;姜奇成;塩田清二;村松郁延
• 通讯作者: 村松郁延

α_1-Adrenoceptor pharmacome : α_<1L>-adrenoceptor and α_<1A>-adrenoceptor in the lower urinary tract.

α_1-肾上腺素受体药组：下尿路的α_<1L>-肾上腺素受体和α_<1A>-肾上腺素受体。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Inter.J.Urol. 17
• 作者: Nishimune A.;Suzuki S.;Yoshiki H.;Morishima S.;Muramatsu I.
• 通讯作者: Muramatsu I.