calreticulinを介した抗菌ペプチドによる好中球活性化メカニズムの解析

钙网蛋白介导的抗菌肽激活中性粒细胞的机制分析

• 批准号: 10172205
• 负责人: 本間 光一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10172205/
• 关键词: calreticulin; 抗菌ペプチド; 好中球

本研究課題は、calreticulinの好中球活性化における機能を解明することを目的としている。これまでに研究代表者は、昆虫の抗菌ペプチドをリードとして、より抗菌性を高めたペプチド(L5)が、マウスにおいてMRSAの感染を防御すること、及びその作用メカニズムの一つとして、L5が好中球を活性化し活性酸素を産生させることを示してきた。さて本年度、解析をさらに進めた結果、L5は細胞膜画分に存在するcalreticulinと特異的に結合することがわかった。そこでL5を好中球に作用させる前処理として、抗calreticulin抗体を添加しておいたところ、L5による好中球の活性化がほぼ完全に阻害されることが明らかになった。さらに、calreticulinの好中球における局在を明らかにするために蛍光抗体法を行ったところ、細胞膜におけるcarleticulinの存在が確認された。これらの結果は、L5による好中球の活性化が細胞膜に存在するcalreticulinを介した反応であることを示している。細胞膜に存在するcalreticulinが、いかにして活性酸素産生系まで情報を伝達するのかを明らかにすることが今後の重要な課題である。

该研究主题旨在阐明钙网蛋白在中性粒细胞激活中的功能。到目前为止，研究人员已经表明，使用昆虫抗菌肽作为铅，肽（L5）已通过较高的抗菌特性增强，可以防止小鼠中的MRSA感染，L5激活中性粒细胞并产生活性氧气，作为其作用机制之一。由于今年的进一步分析，发现L5特异性与钙网蛋白结合，钙网蛋白存在于细胞膜馏分中。因此，当添加抗钙蛋白抗体作为L5作用于嗜中性粒细胞的预处理时，发现L5通过L5激活中性粒细胞几乎完全抑制了中性粒细胞。此外，进行免疫荧光以阐明钙网蛋白在中性粒细胞中的定位，并确认了囊盘蛋白在细胞膜中的存在。这些结果表明，L5的中性粒细胞激活是细胞膜中存在的钙网蛋白介导的反应。一个重要的未来挑战是阐明细胞膜中存在的钙网蛋白如何将信息传输到活跃的氧生产系统。

项目成果

Y.Fujita,S.Kurata,K.Homma and S.Natori: "A novel lectin from Sarcophaga" J.Biol.Chem.273. 9667-9672 (1998)

Y.Fujita、S.Kurata、K.Homma 和 S.Natori：“来自石棺的新型凝集素”J.Biol.Chem.273。

S.-Y.Lee,M.-Y.Cho,J.H.Hyun,K.-M.Lee,K.Homma,S.Natori,S.Kawabata,S.Iwanaga and B.T.Lee: "Molecular cloning of cDNA for pro-phenloxidase activating factor I,a serine protease is induced by lipopolysaccharide or 1,3-β-glucan in coleopteran insect,Hototrichia

S.-Y. Lee、M.-Y. Cho、J. H. Hyun、K.-M. Lee、K. Homma、S. Natori、S. Kawabata、S. Iwanaga 和 B. T. Lee：“pro 的 cDNA 分子克隆-酚氧化酶激活因子 I，一种丝氨酸蛋白酶，由鞘翅目昆虫 Hototrichia 中的脂多糖或 1,3-β-葡聚糖诱导

Y.Tsuji,Y.Nakajima,K.Homma and S.Natori: "Antibacterial activity of a novel 26-KDa serine proteinase in the yellow body of Sarcophaga peregrina (flesh fly) pupae" FEBS Letts.425. 131-133 (1998)

Y.Tsuji、Y.Nakajima、K.Homma 和 S.Natori：“Sarcophaga peregrina（肉蝇）蛹黄色体中新型 26-KDa 丝氨酸蛋白酶的抗菌活性”FEBS Letts.425。

H.Okuyama,S.Kurata,K.Homma and S.Natori: "Selective inactivation of elongation factor-2(EF-2) in free adipocytes obtained by treating Sarcophaga larval fat bodies with chymotrypsin" Insect Biochem.Molec.Biol.28. 301-307 (1998)

H.Okuyama、S.Kurata、K.Homma 和 S.Natori：“用胰凝乳蛋白酶处理 Sarcophaga 幼虫脂肪体获得的游离脂肪细胞中延长因子 2 (EF-2) 的选择性失活”Insect Biochem.Molec.Biol.28

T.Ishino,S.Ohtsuki,K.Homma and S.Natori: "cDNA cloning of prolyl endopeptidase and its involvement in DNA synthesis by Swiss 3T3 cells" J.Biochem.123. 540-545 (1998)

T.Ishino、S.Ohtsuki、K.Homma 和 S.Natori：“脯氨酰内肽酶的 cDNA 克隆及其参与瑞士 3T3 细胞 DNA 合成”J.Biochem.123。