エクダイソンにより分泌が誘導されるリソソーム酵素前駆体の細胞外マトリクス崩壊機構

蜕皮激素诱导溶酶体酶原的细胞外基质分解机制

• 批准号: 07858068
• 负责人: 本間 光一
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07858068/
• 关键词: カテプシンL; 細胞増殖因子

本研究では、エクダイソン刺激により分泌されたカテプシンL前駆体がセンチニクバエ成虫原基の分化に関与する作用メカニズムを知るために、本年度は、細胞外基底膜に存在するカテプシンL基質蛋白の構造、局在を解析することを目的とした。その結果、予想をはるかに上回る以下の研究実績を得た。1、分子量210kDaと200kDaの2種の蛋白をカテプシンL基質蛋白として精製することに成功し、それぞれの蛋白に特異的な抗体を得た。そして、蛍光抗体法により、2種のカテプシンL基質蛋白は、成虫原基組織を取りまく基底膜に存在することを明かにした。また、イムノスクリーニング法により、2種のカテプシンL基質蛋白をコードするcDNAを得た。さらに、2、2種のカテプシンL基質蛋白が、幼虫の脳にも存在することを示した。そして変態期よるとこれらの基質蛋白が、成虫原基における場合と同様に限定分解されることを示した。この結果は、変態期におこる脳の再編成にもカテプシンLが関与する可能性を示す。3、カテプシンL前駆体が、前駆体同士が会合した2量体を形成していることを新たに見出した。そして。この会合には、前駆体のプロ配列部分が必要であることを示した。ところで、カテプシンLの精製過程で、新規細胞増殖因子を発現した。すなわち、4、精製材料として用いている胚細胞の培養上清中に、胚細胞自身に作用する細胞増殖因子が存在することを見出し、これを活性蛋白として精製後、cDNAクローニングを行った。すると、これまで同定されている如何なる細胞増殖因子とアミノ酸一次構造上類似性を示さない、分子量52kDaの新規細胞増殖因子であることが明かとなった。これは、活性蛋白として昆虫類から細胞増殖因子が精製された初めての例である。

This study で は, エ ク ダ イ ソ ン stimulus に よ り secretion さ れ た カ テ プ シ ン 駆 body before L が セ ン チ ニ ク バ エ adult primordium differentiation に の masato and す る role メ カ ニ ズ ム を know る た め に, this year's は, extracellular basement membrane に exist す る カ テ プ シ ン L matrix proteins の structure, analytical す bureau in を る こ と を purpose と し た. Youdaoplaceholder0 そ results, based on を る る に に the actual performance of the previous る research を obtained た. 1, the molecular weight of 210 kda と 200 kda protein の two の を カ テ プ シ ン L matrix proteins と し て refined す る こ と に successful し, そ れ ぞ れ の た を に specific な antibodies. そ し て, 蛍 light antibody に よ り, two の カ テ プ シ ン L matrix proteins は, adult primordium tissue を take り ま く basement membrane に exist す る こ と を Ming か に し た. ま た, イ ム ノ ス ク リ ー ニ ン グ method に よ り, two の カ テ プ シ ン L matrix proteins を コ ー ド す る cDNA を た. Youdaoplaceholder0, 2. The presence of two kinds of <s:1> カテプシ <e:1> L matrix proteins が and larva <s:1> 脳に する とを とを とを indicates た. そ し て - phase state よ る と こ れ ら の matrix proteins が, adult primordium に お け と る occasions with others に finite decomposition さ れ る こ と を shown し た. The <s:1> <s:1> result す, the state period にお る脳 る脳 <e:1> is further compiled into に カテプシ カテプシ が relations and する possibilities を, which are shown as す. 3, カ テ プ シ ン 駆 body が, former 駆 body before L meet with James が し た を 2 quantity body formation し て い る こ と を new た に shows し た. Youdaoplaceholder0 て. The <s:1> に conjunction, the front 駆 body プロ プロ arrangement part が necessary である とを とを とを indicates た. Youdaoplaceholder0 ろで ろで, カテプシ <s:1> the refining process of the first で, the new regulation of cell proliferating factor を appears た た. す な わ ち, 4, and the refined material と し て in い て い る の germ cells in culture supernatant に, the embryonic cells themselves に す る cells raised colonization factors が す る こ と を see し, こ れ を active protein と し て after refining, cDNA ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. す る と, こ れ ま で with fixed さ れ て い る how な る cells raised colonization factor と ア ミ ノ acid on a structure similarity を shown さ な い, molecular weight 52 kda の new rules cells raised colonization factor で あ る こ と が Ming か と な っ た. <s:1> れ である, active protein と と て, insect ら, ら, cell proliferative factor が, refined された, initial めて, <s:1> example である.

项目成果

Ko-ichi Homma: "Purification, Characterization and cDNA Cloning of a Novel Growth Factor from the Conditioned Hedium of NIH-Sape-4, an Enbryonic Cell Line of Sarcophaga peregring (floh Fly" J. Biol. Chem.(発表予定).

Ko-ichi Homma：“来自 NIH-Sape-4 的条件氦气的新型生长因子的纯化、表征和 cDNA 克隆，NIH-Sape-4 是 Sarcophaga peregring (floh Fly) 的胚胎细胞系”J. Biol. Chem.（待提交） 。

Ko-ichi Homma: "Identification of Substrate Proteins for Cathepsin L That Are Selectively Hydrolyzed During the Differentiation of Imaginal Discs of Sarcophaga peregrina" J. Biol. Chem.(発表予定).

Ko-ichi Homma：“在游隼成虫盘分化过程中选择性水解的组织蛋白酶 L 底物蛋白的鉴定”J. Biol。