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エクダイソンにより分泌が誘導されるリソソーム酵素前駆体の細胞外マトリクス崩壊機構

蜕皮激素诱导溶酶体酶原的细胞外基质分解机制

基本信息

批准号：
07858068
负责人：
本間光一
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07858068/
关键词：
カテプシンL 細胞増殖因子

项目摘要

本研究では、エクダイソン刺激により分泌されたカテプシンL前駆体がセンチニクバエ成虫原基の分化に関与する作用メカニズムを知るために、本年度は、細胞外基底膜に存在するカテプシンL基質蛋白の構造、局在を解析することを目的とした。その結果、予想をはるかに上回る以下の研究実績を得た。1、分子量210kDaと200kDaの2種の蛋白をカテプシンL基質蛋白として精製することに成功し、それぞれの蛋白に特異的な抗体を得た。そして、蛍光抗体法により、2種のカテプシンL基質蛋白は、成虫原基組織を取りまく基底膜に存在することを明かにした。また、イムノスクリーニング法により、2種のカテプシンL基質蛋白をコードするcDNAを得た。さらに、2、2種のカテプシンL基質蛋白が、幼虫の脳にも存在することを示した。そして変態期よるとこれらの基質蛋白が、成虫原基における場合と同様に限定分解されることを示した。この結果は、変態期におこる脳の再編成にもカテプシンLが関与する可能性を示す。3、カテプシンL前駆体が、前駆体同士が会合した2量体を形成していることを新たに見出した。そして。この会合には、前駆体のプロ配列部分が必要であることを示した。ところで、カテプシンLの精製過程で、新規細胞増殖因子を発現した。すなわち、4、精製材料として用いている胚細胞の培養上清中に、胚細胞自身に作用する細胞増殖因子が存在することを見出し、これを活性蛋白として精製後、cDNAクローニングを行った。すると、これまで同定されている如何なる細胞増殖因子とアミノ酸一次構造上類似性を示さない、分子量52kDaの新規細胞増殖因子であることが明かとなった。これは、活性蛋白として昆虫類から細胞増殖因子が精製された初めての例である。

This study aims to understand the role of extracellular basement membrane in the secretion of primordia and differentiation of adult primordia. The results of this study are as follows: 1. Two kinds of proteins with molecular weights of 210kDa and 200kDa were successfully purified and antibodies specific to these proteins were obtained. Two kinds of matrix proteins were identified by light antibody method, and the basement membrane of adult was extracted. The cDNA of two kinds of protein was obtained by using the method of gene expression. In addition, it was shown that 2 or 2 types of Katesphin L matrix proteins are present in the larvae. In the case of adult primordia, the matrix protein is expressed in a restricted manner. The results show the possibility of reorganizing the system into a new system. 3. Before the formation of the body, before the formation of the body, after the formation of the bodyそして。It is necessary to arrange the parts of the body before the meeting. In the process of purification, new cell growth factors are produced. 4. Purified material and culture supernatant of embryo cells, cell growth factors that act on embryo cells themselves, presence of active proteins, purification of cDNA, etc. A new type of cell growth factor with molecular weight of 52kDa was identified. The active protein is purified from insect cell growth factors.