家族性筋萎縮性側索硬化症型変異を持つCu/ZnSODのGDNF/Ret系への影響

家族性肌萎缩侧索硬化症突变型 Cu/ZnSOD 对 GDNF/Ret 系统的影响

• 批准号: 10176211
• 负责人: 岩下 寿秀
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10176211/
• 关键词: GDNF; RET; 筋萎縮性側索硬化症; Cu; Zn SOD; 酸化ストレス

脊髄前角運動神経細胞には神経栄養因子作用を有するGDNF(glial cell line dcrived neurotrophic factor)の受容体であるRetチロシンキナーゼが発現している。脊髄前角運動神経細胞が変性する筋萎縮性側索硬化症の一部に常染色体優性遺伝形式をとる家族性筋萎縮性側索硬化症(FALS)があり、一部の患者においてCu/Zn-SOD遺伝子のgerm-line-mutationが見つかっている。現在、神経細胞内にてNOから生成されたperoxynitrite(酸化ストレス作用を有する)と変異Cu/Zn-SOD蛋白との反応性が高まり、神経細胞の生存に重要な蛋白質のチロシン残基等をニトロ化することが想定されている。今回、酸化ストレス及び変異Cu/Zn-SOD蛋白がRet蛋白にどのような影響を及ぼすかについて検討を試みた。1、 FALS型変異(Ala4Val,Cys6Phe,His43Arg,His46Arg,His48Gln,Asp90Ala,Gly93Ala,Glu100Gly,Asp101Gly,Ile104Phe,Leu106Valの計11種類)を有するCu/Zn-SOD cDNAを活性型Ret蛋白と共に線維芽細胞に強制発現させた。ウエスタンブロットを行うと、正常なCu/Zn-SOD蛋白とほぼ同じ高さ(約21kDa)にバンドが出るのがA4V,C6F,H43R,H46R,H48Q,G93A,L106Vの計7種類、正常よりも低い高さにバンドが出るのはD90A,E100G,D101G(約18kDa),I104F(約20kDa)の計4種類であり、蛋白の大きさとしてバラツキがあるものの、正常Cu/Zn-SOD蛋白と同じ程度に安定に発現する。2、 内因性の酸化ストレスであるperoxynitriteを作用させると、Ret蛋白のin vivo及びin vitroでのチロシンリン酸化が数倍に亢進した。現在、その作用機序について検討中である。

Ridge angular motion 経 god before marrow cells に は god 経 tech students.their ownship を raise factor is す る GDNF (glial cell line dcrived neurotrophic factor) の is let body で あ る Ret チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ が 発 now し て い る. Ridge angular motion 経 god before marrow cells が - sex す る reinforcement atrophic amyotrophic lateral sclerosis の a に autosomal dominance heritage 伝 form を と る familial reinforcement atrophic amyotrophic lateral sclerosis (FALS) が あ り, patients with a の に お い て traces of Cu/zinc - SOD 伝 son の germ line - mutation が see つ か っ て い る. Now, god 経 intracellular に て NO か ら generated さ れ た peroxynitrite (acidification ス ト レ を ス is す る) と - different Cu/zinc - SOD protein と の anti 応 が high ま り, god の 経 cell survival に important な protein の チ ロ シ ン residues such as を ニ ト ロ change す る こ と が scenarios さ れ て い る. This back, acidification ス ト レ ス and び - different Cu/zinc - SOD protein が Ret protein に ど の よ う な influence を and ぼ す か に つ い て 検 please try を み た. 1 FALS - vision (Ala4Val Cys6Phe, His43Arg, His46Arg, His48Gln, Asp90Ala, Gly93Ala, Glu100Gly, Asp101Gly, Ile104Phe, Leu106Val の 11 species) を have す る C u/Zn-SOD cDNAを active Ret protein と co-に linear sprouting cells に forced occurrence させた. ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト を line う と, normal な Cu/zinc - SOD protein と ほ ぼ with high じ さ (about 21 kda) に バ ン ド が out る の が A4V, C6F, H43R, H46R, H48Q, G93A, L106V の 7 kinds, normal よ り も low い high さ に バ ン ド が out る の は D90A, E100G, D101G (about 18 kda), I104F (about 20 kda) の 4 kinds で あ り, protein の き さ と し て バ ラ ツ キ が あ る も の の, normal Cu/zinc - SOD protein と degree with じ に settle に 発 now す る. 2, endogenous の acidification ス ト レ ス で あ る peroxynitrite を role さ せ る と, の Ret protein in vivo and び in vitro で の チ ロ シ ン リ ン acidification several times が に hyperthyroidism し た. Now, そ そ is in the process of に, に, て検 and である.