神経分化、再生におけるRet蛋白の機能解析

Ret蛋白在神经分化和再生中的功能分析

• 批准号: 09770143
• 负责人: 岩下 寿秀
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770143/
• 关键词: RETプロトオンコジーン; GDNF; チロシンキナーゼ; 多発性内分泌腫瘍症; ヒルシュスプルング病; retプロトオンコジーン

RETプロトオンコジーン(以下RET)はGDNF(グリア細胞株由来神経栄養因子)、NTN等のGDNFファミリーをリガンドとする受容体型チロシンキナーゼをコードし、甲状腺髄様癌、副腎褐色細胞腫を遺伝的に発症する多発性内分秘腫瘍症(MEN)2A型、2B型、家族性甲状腺髄様癌及び大腸腸管神経節が欠損したために生じるヒルシュスプルング病(以下HSCR病)の原因遺伝子であることが明らかになっている。本研究ではHSCR病型変異を有するRET蛋白の不活化する機序を生化学的に解析した。RETにHSCR病に認められたn種類の変異(E762Q,S765P,S767,F893L,R897Q,K907E,E921K,R972G,P973L,M980T,P1039Q,L1061P)を導入し、神経系細胞SK-N-MCに発現を試みた。1漏類のうち9種類のHSCR病型変異に(S765P,S767P,F893L,R897Q,K907E,E921K,P973L,P1039Q,L1061P)ついては、Ret蛋白の良好な発現を得ることができず、コントロール(c-Rct)の十分の一程度であった。10種類のHSCR病型変異を有するRct蛋白は蛋白レベルで不安定である可能性が示唆された。3種類(E762Q,R972G,M980T)の変異を有するRet蛋白は良好な発現を得ることができ、それらの発現しているSK-N-MC細胞とc-Ret蛋白が発現しているSK-N-MC細胞の間でシグナル伝達機構のどこに違いがあるのかを検討している。

RET プ ロ ト オ ン コ ジ ー ン (RET) は GDNF (グ リ ア cell lines by return 経 tech students.their ownship raise factor), NTN の GDNF フ ァ ミ リ ー を リ ガ ン ド と す る by capacity size チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ を コ ー ド し, thyroid marrow and others in carcinoma and adrenal gland brown cells swollen を but 伝 に 発 disease す る 発 sex inside cent secret more swollen sores (MEN) 2 a Type, 2 b, familial thyroid marrow and others in carcinoma び section e. insufflate god 経 が owe loss し た た め に raw じ る ヒ ル シ ュ ス プ ル ン グ disease (HSCR disease) cause of の survived 伝 で あ る こ と が Ming ら か に な っ て い る. In this study, the disease type variation of で た HSCR is を, which involves the するRET protein <s:1> inactivation する mechanism, を biochemical に analysis, and た た. RET に に HSCR disease recognition め ら れ た n kinds の - vision (E762Q S765P, S767, F893L, R897Q, K907E, E921K, R972G, P973L, M980T, P1039Q, L1061P) を import し, god 経 cells SK - n - MC に 発 を now try み た. 1 leakage class の う ち 9 kinds の HSCR disease type - different に (S765P S767P, F893L, R897Q, K907E, E921K, P973L, P1039Q, L1061P) つ い て は, Ret protein の good な 発 を must now る こ と が で き ず, コ ン ト ロ ー ル (c - Rct) の is の Degree であった. The variation of 10 types of HSCR disease types を indicates the possibility of するRct protein protein レベ で instability である が suggesting された. 3 types (E762Q R972G, M980T) の - different を have す る Ret protein は good な 発 を must now る こ と が で き, そ れ ら の 発 now し て い る SK - N - MC cell と c - Ret protein が 発 now し て い る SK - N - between MC cell の で シ グ ナ ル 伝 of institutions の ど こ に violations い が あ る の か を beg し 検 て い Youdaoplaceholder0.

项目成果

Masahide Takahashi: "Co-segregation of MEN2A and Hirschsprungs disdase : the same mutation of RET with both gain and loss-of-function?" Hum.Mutation. in press.

Masahide Takahashi：“MEN2A 和先天性巨结肠症的共分离：相同的 RET 突变，同时获得功能和丧失功能？”

Seiko Nakayama: "Implication of expression of GDNF/Ret signalling components in differentiation of bone marrow hematopoietic cells." Brit.J.Hematol.in press.

Seiko Nakayama：“GDNF/Ret 信号成分的表达对骨髓造血细胞分化的影响。”

Naoya Asai: "Mechanism of Ret activation by a mutation at aspartic acid 631 identified in sporadic pheochromocytoma." Biochem. Biophys.Res.Commun.255. 587-590 (1999)

Naoya Asai：“散发性嗜铬细胞瘤中发现的天冬氨酸 631 突变激活 Ret 的机制。”

Chika Nozaki: "Calcium-dependent Ret activation by GDNF and neurturin." Oncogene. 16. 293-299 (1998)

Chika Nozaki：“GDNF 和 neurturin 激活钙依赖性 Ret。”

Mikinao Ohiwa: "Characterization of Ret-Shc-Grb2 complex induced by GDNF,MEN2A and MEN2B mutations." Biochem.Biolphys.Res.Commun.237. 747-751 (1997)

Mikinao Ohiwa：“GDNF、MEN2A 和 MEN2B 突变诱导的 Ret-Shc-Grb2 复合物的表征。”