細胞周期の活性化による分裂組織の形成機構

细胞周期激活的分生组织形成机制

• 批准号: 10182207
• 负责人: 梅田 正明
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10182207/
• 关键词: 植物; 細胞分裂; 細胞周期; アラビドプシス; イネ; サイクリン依存性キナーゼ; 形質転換植物

本研究では細胞周期の活性化因子としてCDK活性化キナーゼ(CAK)に注目して、植物細胞の分裂活性の維持および活性化における役割を明らかにすることを目的とした。まず、本研究で単離したアラビドプシスのCAK(Cak1At)のキナーゼ活性を解析した結果、Cak1AtはヒトのCDK2のT160を特異的にリン酸化することが明らかになった。また、ゲルろ過によりCAK活性を有する画分を同定したところ、約180kDaのCak1At複合体の溶出画分と一致した。次に、グルココルチコイド転写誘導系を用いて、センス・アンチセンスの両方向でcak1Atをアラビドプシスで発現させたところ、センス・アンチセンスともDEX処理により根の伸長が阻害されることが明らかになった。そこで、cyclin-GUSをこれらのトランスジェニック植物に入れて根端分裂組織の細胞分裂を観察したところ、DEX処理によりG2/M期以外のステージで細胞周期が停止していることが明らかになった。維管束、皮層、columella細胞層の始原細胞についてさらに詳細に観察したところ、いずれの場合もDEX処理により始原細胞がそれぞれの細胞層特異的に分化していた。したがって、個々の細胞の運命を決定する上で、細胞分裂は分化の方向性にも積極的に関与しているものと考えられた。一方、イネのR2についてもCak1Atと同様にキナーゼ活性を解析したところ、R2はヒトのCDK2とイネのCdc2Os1をリン酸化することが明らかになった。また、ゲルろ過によりR2複合体を解析したところ、R2は少なくとも3種類のタンパク質複合体(70kDa,105kDa,190kDa)を形成し、その中で105kDa複合体が活性型であることが明らかになった。したがって、190kDa複合体はR2のキナーゼ活性を阻害する因子を含んでいることが予想された。

This study で は の cell cycle activation factor と し て CDK activation キ ナ ー ゼ (CAK) に attention し て の mitotic activity, plant cells の maintain お よ び activeness に お け る "を cut Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. ま ず, this study で 単 from し た ア ラ ビ ド プ シ ス の CAK (Cak1At) の キ ナ ー ゼ active を parsing し た results, Cak1At は ヒ ト の CDK2 の T160 を specific に リ ン acidification す る こ と が Ming ら か に な っ た. Ever ま た, ゲ ル ろ に よ り CAK activity を す る painting with fixed points を し た と こ ろ, about 180 kda の Cak1At complex の dissolution draw points と consistent し た. に, グ ル コ コ ル チ コ イ ド induced is planning to write を with い て, セ ン ス · ア ン チ セ ン ス の struck direction で cak1At を ア ラ ビ ド プ シ ス で 発 now さ せ た と こ ろ, セ ン ス · ア ン チ セ ン ス と も DEX 処 Richard に よ の り root elongation が resistance against さ れ る こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で, cyclin - GUS を こ れ ら の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ に ク plants into れ て radicular separatist group の cell division を 観 examine し た と こ ろ, DEX 処 Richard に よ り G2 / M phase outside の ス テ ー ジ で cell cycle が stop し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Vascular bundle, cortex, columella cells layer の beginning the original に つ い て さ ら に detailed に 観 examine し た と こ ろ, い ず れ の occasions も DEX 処 Richard に よ り beginning cell が そ れ ぞ れ の cells layer specific に し て い た. し た が っ て, a 々 の cells の luck を decided す る で, cell division は の directional differentiation に も positive に masato and し て い る も の と exam え ら れ た. Party, イ ネ の R2 に つ い て も Cak1At と with others に キ ナ ー ゼ active を parsing し た と こ ろ, R2 は ヒ ト の CDK2 と イ ネ の Cdc2Os1 を リ ン acidification す る こ と が Ming ら か に な っ た. Ever ま た, ゲ ル ろ に よ り R2 complex analytical し を た と こ ろ, less R2 は な く と も 3 kinds の タ ン パ ク qualitative complex (70 kda, 105 kda, 190 kda) を し, そ の で 105 kda complex が activity type で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. し た が っ て, 190 kda complex は R2 の キ ナ ー ゼ active を resistance against す を る factors including ん で い る こ と が to think さ れ た.

项目成果

Yu,L.-H.: "Molecular characterization of metallothionein genes in plants." Plant Biotechnology. 15. 167-172 (1998)

Yu，L.-H.：“植物中金属硫蛋白基因的分子特征。”

Kawai,M.: "Stimulation of adenylate kinase in rice seedlings under submergence stress." Journal of Plant Physiology. 152. 533-539 (1998)

Kawai,M.：“淹没胁迫下水稻幼苗腺苷酸激酶的刺激。”

Umeda,M.: "Differential expression of genes for cyclin-dependent protein kinases in rice plants." Plant Physiology. 119. 31-40 (1999)

Umeda,M.：“水稻植物中细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶基因的差异表达。”

Umeda,M.: "A distinct cyclin-dependent kinase-activating kinase of Arabidopsis thaliana." Proceedings of the National Academy of Sciences (USA). 95. 5021-5026 (1998)

Umeda,M.：“拟南芥中一种独特的细胞周期蛋白依赖性激酶激活激酶。”

Yamaguchi,M.: "A rice homolog of Cdk7/MO15 phosphorylates both cyclin-dependent protein kinases and the carboxy-terminal domain of RNA polymerase II." The Plant Journal. 16. 613-619 (1998)

Yamaguchi,M.：“Cdk7/MO15 的水稻同源物能够磷酸化细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶和 RNA 聚合酶 II 的羧基末端结构域。”