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植物の細胞周期関連因子による細胞質分裂の制御機構

植物细胞周期相关因子对胞质分裂的控制机制

基本信息

批准号：
11740435
负责人：
梅田正明
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞板の形成を伴う細胞質分裂は植物に特徴的なプロセスであり、分裂の方向性を決定する上でも重要である。そこで、本研究ではM期に働くサイクリン依存性キナーゼ(CDK)とサイクリンの特異的な複合体を解析し、その基質の単離を通して細胞質分裂における生理的役割を明らかにすることを目指した。本年度はG2〜M期で発現するCdc2Os3と特異的に結合するサイクリンとして、CycOs4の他にCycOs2を同定した。CycOs2はCycOs4と同様にB2タイプのサイクリンに属する。しかし、CycOs4を酵母で発現させると生育阻害を起こすのに対し、CycOs2は生育阻害を起こさなかった。したがって、植物細胞のG2〜M期においても機能的な役割分担をしていることが考えられる。これらのCDK/サイクリン複合体が活性型か否かを解析するために、昆虫細胞で組換えタンパク質を発現させ、ヒストンに対するキナーゼ活性を調べている。一方、G2〜M期で発現するCDKの制御機構をさらに解析する目的で、アラビドプシスのB2タイプのCDK(CDKB2)を単離し、これをbaitとして用いてCDKB2と相互作用する因子をアラビドプシスのcDNAライブラリーから酵母two-hybrid法により探索した。その結果、Cks1の他にDタイプのサイクリンがCDKB2と相互作用することが明らかになった。アラビドプシスには複数種のサイクリンDが存在するが、今回のスクリーニングで単離されたものは1種類のサイクリンに限られていた。この結果は、CDKB2が特定のサイクリンDと結合しG2〜M期を制御していることを示している。一般に、サイクリンDは外的刺激を感受する細胞周期因子としてG1〜S期で主に機能することが知られている。したがって、今回の結果は植物のサイクリンDがG2〜M期にも機能していることを示すものであり、全く新たな知見である。現在、CDKB2の野生型・ドミナントネガティブ型、およびサイクリンDを過剰発現する形質転換植物を作成中である。

Cell plate formation is accompanied by cytoplasmic division, which is important in determining the orientation of plant characteristics. In this study, we analyzed the physiological function of CDK and CDK in cytokinesis, and found that CDK and CDK were the most important factors in cytokinesis. This year, Cdc2 Os3 and CycOs4 have been observed in G2-M period. CycOs2 is similar to CycOs4 and belongs to CycOs4. Cycos4 Yeast Development and Birth Resistance It is also possible to examine the sharing of functions in plant cells during the G2-M phase. The CDK/CDR3 complex is active, active, and active in insect cells. The CDK/CDR3 complex is active. The regulatory mechanism of CDK expressed in G2-M phase was analyzed for the purpose of identifying and identifying the CDK(CDKB2) in the absence of protein, and the yeast two-hybrid method was used to explore the factors that interact with CDKB2 in the absence of protein. As a result, Cks1 and CDKB2 interact with each other. A number of different types of services are available. As a result, CDKB2 can be controlled in the G2 ~ M period with specific support and integration. In general, cell cycle factors are sensitive to external stimuli and are active in G1-S phases. The results of this study are as follows: 1. The function of plant growth in G2 ~ M period is as follows: Now, CDKB2 wild-type plants are in the process of being produced.