トランスポゾン・タギングによる発芽関連遺伝子の探索と解析

通过转座子标签搜索和分析发芽相关基因

• 批准号: 10182211
• 负责人: 伊藤 紀美子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10182211/
• 关键词: トランスポゾン・タギング; Ac; ジベレリン; αーアミラーゼ

発芽は栄養成長期の器官形成における重要なステップである。発芽時に、イネでは植物ホルモン・ジベレリン(GA)が重要な役割を担い、胚乳貯蔵物質の分解酵素の合成・分泌、芽・根の伸長および葉の展開を促進する。本研究では、トランスポゾン・タギングによりイネにおけるGA情報伝達系の調節因子を含む発芽関連遺伝子の変異体をスクリーニングした。(1) アラビドプシス等で知られるGA情報伝達系に関わる調節遺伝因子の既知配列に基づき、イネにおける相同配列またはイネの遺伝子配列をデータベースから得てプライマーを設計した。これらのプライマーを用いて、Acの高頻度転移系統から得た9594個体のプールDNAをテンプレートにPCRを行い、遺伝子の破壊株を探索したが、現在のところまだ見つかっていない。(2) Acが転移あるいは分離によって除かれてもGA応答性の変異を示す変異体を選抜した。これらの変異体ではRAmylA/GUS遺伝子の発現はほぼ正常であったが、胚乳の糖化が全く起こらないか、遅延していた。これらの変異体の胚から誘導したカルスを用いて、RAmylAがコードするaアミラーゼアイソフォームA+Bの翻訳、分泌制御に関わる生化学的な解析を行った。aアミラーゼはGAのシグナルにより細胞内に流入したCa^<2+>によって、翻訳・分泌レベルにおいて制御が行われる事が知られている。そこで、Ca^<2+>ポンプ、Ca^<2+>チャネル、PLC、ER-ATPase、CaM等の阻害剤を用いてaアミラーゼの翻訳、分泌量の増減を調べた。その結果、これらの変異体ではCa^<2+>ポンプ、PLC、ER-ATPaseは正常に働いているが、Ca^<2+>チャネルかまたはCaMについて、異常が起きている可能性が示唆された。

It is important to develop long-term organ formation. During germination and development, plant growth factors (GA) play an important role in cutting, synthesis and secretion of enzymes decomposing endosperm storage substances, elongation of buds and roots, and leaf development. In this study, the regulatory factors of GA information transmission system, including the variation of genetic correlation factors, were studied. (1)The genetic information of GA is related to the genetic information system. The genetic information system of GA is related to the genetic information system. The genetic information system of GA is related to the genetic information system of GA. The genetic information system of GA is related to the genetic information system of GA. The high frequency shift system of this kind has been found in 9594 individuals. The DNA of these individuals has been detected in PCR, and the DNA of these individuals has been detected in PCR. (2)The difference between the two is that The expression of RAmyLA/GUS gene is different from that of normal gene, and the glycation of endosperm is different from that of normal gene. The biochemical analysis of A+B and its secretion control was carried out in the study of the induction of different enzymes. A. B. A. A. B. A. B. A. A. B. B. A. B. A. B. B. A. B. B. The inhibition agents such as Ca^<2+>, Ca ^<2+>, PLC, ER-ATPase, CaM, etc. are used to regulate the change of secretion and the increase of secretion. The results show that Ca^<2+>, PLC and ER-ATPase are abnormal, Ca^<2+> and CaM are abnormal.

项目成果

M.A.Kashem: "Effects of(+)-8′,8′,8′-trifluoroabscisic acid on alfa-amylase expression and sugar accumulation in rice cells." Planta. 205. 319-326 (1998)

M.A. Kashem：“(+)-8′,8′,8′-三氟脱落酸对水稻细胞中α-淀粉酶表达和糖积累的影响。”205. 319-326 (1998)