Dynamische 13C-Stoffflussanalyse unter metabolisch und prozesstechnisch instationären Bedingungen

代谢和工艺技术不稳定条件下的动态 13C 物质流分析

基本信息

项目摘要

In diesem Projekt soll die Methode der metabolische Stofflußanalyse mit Hilfe von 13C-Markierungsexperimenten erstmals auf die metabolisch instationäre Situation erweitert werden und damit auf die in der industriellen Produktion vorherrschenden Bedingungen. Die Anwendung dieses Standardwerkzeugs des Metabolic Engineering war bisher auf die kontinuierliche Kultur beschränkt. Reaktions- und prozesstechnische Grundlage der neuen Methode ist ein zu entwickelnder spezieller Sensorreaktor für die Durchführung von isotopisch instationären 13C-Markierungsexperimenten. Dieser wird für die Dauer des Experiments mit Hilfe regelungstechnischer Methoden synchron zum Hauptreaktor betrieben. Von Seiten der Analysentechnik wird dann erstmalig die 13C-Markierungsanreicherung in den intrazellulären Intermediaten direkt mit Hilfe hochsensitiver Meßmethoden (LC-MS, 2D-NMR) gemessen. Die Informationsausbeute wird durch Hinzunahme zeitlich aufgelöster Markierungsdaten weiter erhöht. Ziel der Modellbildung und Datenauswertung ist schließlich die Schätzung der intrazellulären metabolischen Stofflüsse aus dem so gewonnenen instationären Datensatz. Zugleich werden modellgestützte Methoden zur statistischen Auswertung und zur optimalen Versuchsplanung mit dem Ziel einer Optimierung der Informationsausbeute entwickelt und angewendet.
在该项目中,我们采用了 13C-Markierungsexperimenten 代谢方法和 13C-Markierungsexperimenten 方法,以了解工业生产中的情况。代谢工程的标准工作是与文化相关的。新方法的反应和技术基础是 13C 标记实验中同位素安装的传感器反应器。与 Hilfe regelungstechnischer Methoden Synchron zum Hauptreaktor betrieben 一起进行所有实验。分析技术中的 13C-Markierungsanreicherung 是通过 Hilfe Hochsensitiver Meßmethoden (LC-MS, 2D-NMR) 进行的。请参阅以下信息以了解有关标记日期的信息。模型建立和数据的生成是细胞内代谢物质的Schließlich schätzung aus dem so gewonnenen instationären Datensatz。 Zugleich werden modellgestützte Methoden zur statistischen Auswertung and zur optimizationen Versuchsplanung mit dem Ziel einer Optimierung der Informationsausbeute entwickelt and angewendet.

项目成果

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知道了