ALアミロイドーシスにおける形質細胞のクローナリティーの遺伝子学的解析

AL 淀粉样变性浆细胞克隆性的遗传分析

• 批准号: 10877032
• 负责人: 石原 得博
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877032/
• 关键词: ALアミロイドーシス; 形質細胞; 免疫組織化学; PCR; クローナリティー

ALアミロイドーシスでの、前駆体蛋白質であるクローナルな免疫グロブリンの存在を抗κ、抗λ抗体を用い免疫組織化学的に、再構成した免疫グロブリン遺伝子を増幅するPCR法を用い分子遺伝学的に検討した。また、免疫グロブリン軽鎖のアミノ酸配列を、分子遺伝学的手法により同定した。全身性ALアミロイドーシスは原発性アミロイドーシスの剖検症例12例の骨髄を用いた。骨髄は過形成の傾向にあり、形質細胞の占める割合は5〜15%と正常に比べて増加していた。抗κあるいは抗λ抗体の一方で明らかに優位な染色態度を呈するものは8例あった。分子遺伝子学的には、用いた骨髄標本が脱灰等の操作のためPCRには不適当であった。限局性ALアミロイドーシスでは、生検で局所に形質細胞の浸潤が見られた16例(皮膚7例、呼吸器5例、膀胱1例、眼瞼1例、舌1例、唾液腺1例)を用いた。リンパ球や形質細胞は、アミロイドや血管の周囲に集簇して浸潤する傾向が見られた。抗κ、抗λで優位な染色性の差が見られたものは16例中6例あり、差がなかったものが3例、判定の困難なものが7例であった。分子遺伝子学的には、16例中12例でPCR産物が検出され、モノクローナリティーが検出されたものは9例、ポリクローナルなものは3例であった。16例中13例で少なくともどちらかの方法によって局所の形質細胞のモノクローナリティーを証明できた。喉頭限局性のALλタイプのアミロイドーシスの新鮮材料を用い、λ鎖のV領域を増幅するprimerによりPCRを行った。λ鎖はサブクラスごとに変異が大きいため、各サブクラスごとのprimerが必要となる。この症例ではλIを増幅するPCRによりモノクローナルバンドが検出された。このDNA断片の塩基配列から、アミノ酸配列が決定できた。同様にして、新鮮材料からアミロイド前駆蛋白のアミノ酸配列の決定ができると期待できる。

AL ア ミ ロ イ ド ー シ ス で の, former 駆 body protein で あ る ク ロ ー ナ ル な immune グ ロ ブ リ ン の is を kappa, lambda predominate antibody resistance を い immunohistochemical に, reconstitution し た immune グ ロ ブ リ ン posthumous son 伝 を rights of す を る PCR method with い molecules but 伝 learn に beg し 検 た. ま た, immune グ ロ ブ リ ン 軽 lock の ア ミ ノ acid with column を, molecular but 伝 learn technique に よ り with fixed し た. Systemic AL ア ミ ロ イ ド ー シ ス は original 発 sex ア ミ ロ イ ド ー シ ス の cutting 検 cases 12 cases の bone marrow を with い た. Excessive bone marrow formation has a tendency to にあ にあ, and the proportion of plasmoid cells in the める cleavage is <s:1> 5 to 15%と. The と normal に is increased by て て た た た compared with べて. Anti-κ ある ある <s:1> anti-λ antibody <s:1> one side で bright ら に に superior position な staining attitude を showed する <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> あった in 8 cases あった. The <s:1> operations such as に であった in molecular genetics and が deashing of <s:1> た bone marrow specimens are inappropriate であった ためPCRに <e:1> であった. Limit bureau sex AL ア ミ ロ イ ド ー シ ス で は, raw 検 で bureau に の character cell infiltrate が see ら れ た 16 cases (7 cases of skin, breathing apparatus in 5 cases, 1 case was bladder, 1 case of eyelid, tongue cases, 1 cases of salivary glands) を with い た. リ ン パ ball や character cell は, ア ミ ロ イ ド や vascular の weeks 囲 に cluster し て infiltrating す る tendency が see ら れ た. Resistance to kappa, lambda で optimal bit な staining resistance predominate の poor が see ら れ た も の は 16 cases, 6 cases あ り, difference が な か っ た も の が 3 cases, difficulty judge の な も の が 7 cases で あ っ た. Molecules but behavior 伝 に は, 16 cases, 12 cases が で PCR products 検 out さ れ, モ ノ ク ロ ー ナ リ テ ィ ー が 検 out さ れ た も の は 9 cases, ポ リ ク ロ ー ナ ル な も の は 3 cases で あ っ た. 16 cases, 13 cases less で な く と も ど ち ら か の way に よ っ て bureau の character cell の モ ノ ク ロ ー ナ リ テ ィ ー を prove で き た. Larynx bureau limited sexual の AL lambda タ イ プ の ア ミ ロ イ ド ー シ ス の fresh material を い, lambda lock の V field を rights of す る primer に よ り PCR line を っ た. The λ lock サブ サブ ラスごとに ラスごとに varies が large <s:1> ため ため, and each サブ ラスごと ラスごと <s:1> primerが が is necessary となる. Cases こ の で は lambda I を rights of す る PCR に よ り モ ノ ク ロ ー ナ ル バ ン ド が 検 out さ れ た. The <s:1> DNA fragment <s:1> base coordination た ら and ア ノ ノ acid coordination が determine で た た た. With others in に し て, fresh material か ら ア ミ ロ イ ド 駆 protein before の ア ミ ノ acid with column の decided が で き る と expect で き る.

项目成果

Mihoko Setoguchi: "Analysis of plasma cell clonality in localized AL amyloidosis"Amyloid: Int. J. Exp. Clin. Invest.. 7(in press). (2000)

Mihoko Setoguchi：“局部 AL 淀粉样变性中浆细胞克隆性的分析”淀粉样蛋白：Int。

Mihoko Setoguchi: "Conjunctival AL amyloidosis associated with a low-grade B-cell lymphoma"Amyloid: Int. J. Exp. Clin. Invest.. 6. 210-214 (1999)

Mihoko Setoguchi：“与低度 B 细胞淋巴瘤相关的结膜 AL 淀粉样变性”淀粉样蛋白：Int。