肺癌細胞におけるオートクリン因子受容体-G蛋白シグナル伝達機構の解明

阐明肺癌细胞自分泌因子受体-G蛋白信号转导机制

• 批准号: 10877097
• 负责人: 村山 芳武
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877097/
• 关键词: 肺癌; オートクリン因子; G蛋白質

1、 gastrin-releasing peptide(GRP)受容体共役G蛋白の決定マウスGRP受容体cDNAとGasのC端5残基をGs以外のすべてのGaと入れ換えたハイブリッドGas(Gas/x)cDNAとをCOS細胞に発現させ、GRP刺激によるcAMP産生量を測定した。ハイブリッドGasのうち、GqファミリーのGq、G14、G16とG12ファミリーのG12、G13の場合に、GRPの容量依存性にcAMMP産生量が増加することが明らかとなった。サブスタンスP誘導体[D-Arg^1,D-Phe^5,D-Trp^<7,9>,Leu^<11>]substancePの共存でこれらのcAMP産生増加が抑制されることも明らかとなった。GRP受容体とGqファミリーとの共役は従来の報告と同様であるが、G12ファミリーについては、兵役を示唆する報告はあったが、はっきりと示すことができたことは意義があると言える。2、 GRP受容体のシグナル伝達経路の検討G12、G13の下流について、低分子量G蛋白rhoを介してシグナル伝達しているという報告がある。rhoの下流について、特にfocal adhesion kinase(FAK)のチロシンリン酸化を促進するか否かを検討した。まず肺胞上皮癌細胞であるA549細胞にマウスGRP受容体を安定発現させた細胞株を樹立した。この細胞にGRPを処理することにより、FAKのチロシンリン酸化促進が明らかとなった。しかし、これは付着状態の場合であり、細胞を浮遊状態で同様の処理をしてもFAKのチロシンリン酸化促進は認められなかった。一方、GRPをオートクリン因子としていることが知られている肺小細胞癌H345細胞では、浮遊状態であってもGRP処理によるFAKのチロシンリン酸化促進が認められた。H345の場合にはインテグリン非依存性のFAKチロシンリン酸化機構の存在が示唆された。

1. gastrin-releasing Peptide (GRP) by the G protein の decided to let the body a total of service マ ウ ス GRP by let body cDNA と Gas の C terminal 5 residues を Gs outside の す べ て の Ga と change into れ え た ハ イ ブ リ ッ ド Gas (Gas/x) cDNA と を COS cell に 発 now さ せ, GRP stimulation に よ る discharge cAMP を determination し た. ハ イ ブ リ ッ ド Gas の う ち, Gq フ ァ ミ リ ー の Gq, G14 cabal resentful and G16 と a G12 フ ァ ミ リ ー の a G12, G13 の に, GRP の capacity dependence に discharge cAMMP が raised plus す る こ と が Ming ら か と な っ た. サ ブ ス タ ン ス P induced body [D - Arg ^ 1, D - Phe ^ 5, D - Trp ^ 7, 9 > <, Leu ^ < 11 >] substanceP の coexistence で こ れ ら の cAMP have raised が requirement by inhibiting さ れ る こ と も Ming ら か と な っ た. GRP by let body と Gq フ ァ ミ リ ー と の altogether "は 従 to と の report with others で あ る が, a G12 フ ァ ミ リ ー に つ い て は, military を sucking す る report は あ っ た が, は っ き り と shown す こ と が で き た こ と は meaning が あ る と said え る. 2, GRP let body の シ グ ナ ル 伝 の da 経 road beg a G12, G13 検 の obscene に つ い て, low molecular weight protein G rho を interface し て シ グ ナ ル 伝 da し て い る と い う report が あ る. Rho の obscene に つ い て, に focal adhesion kinase (FAK () の チ ロ シ ン リ ン acidification を promote す る か no か を beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 lung cell epithelial cancer cells であるA549 cells に ウスGRP receptor を stable growth させた cell line を establishment た. こ の cells に GRP を 処 Richard す る こ と に よ り, FAK (の チ ロ シ ン リ ン acidification promote が Ming ら か と な っ た. し か し, こ れ の は pay the state occasions で あ り, cell を floating state で with others の 処 Richard を し て も FAK (の チ ロ シ ン リ ン acidification promote は recognize め ら れ な か っ た. Party, GRP を オ ー ト ク リ ン factor と し て い る こ と が know ら れ て い H345 る small cell lung carcinoma cell で は, floating state で あ っ て も GRP 処 Richard に よ る FAK (の チ ロ シ ン リ ン acidification promote が recognize め ら れ た. In H345, there is a situation of に テグリ テグリ テグリ テグリ non-dependent <e:1> FAKチロシ リ リ the presence of an acidifying mechanism が indicates された.