心筋組織における内在性アドレナリン作動性細胞の同定とその機能的意義の解析

本研究の目的は、最近心筋組織内にその存在が示唆されている、カテコラミンを産生ずる細胞(内在性心アドレナリン作動性[intrinsic cardiac adrenergic:ICA]細胞)の発生学的由来を同定し、機能的意義を明らかにすることであった。1. 二ワトリ胚由来培養心室筋細胞及び新生仔ラット由来培養心室筋細胞におけるICA細胞の同定:10日目のニワトリ胚あるいは生直後の新生仔ラットより心室筋細胞を単離・培養し、RT-PCR法を用いてtyrosine hydroxylase(TH)およびneuron-specific enolase (NSE)の発現について検討を加えた。その結果、ニワトリ胚および新生仔ラットの両者由来の培養心室筋細胞において、脳に比肩するTHの発現が認められた。それに対しNSEに関しては、ラットでは脳と心室筋の両者において発現が認められたが、ニワトリ胚では心室筋細胞における発現レベルは低かった。以上のデータは、これらの培養心室筋細胞においては非心筋細胞の混入が非常に少ない(<5%)というわれわれの研究室の以前のデータを考えると興味深く、ICA細胞の存在を強く示唆するものであると考える。今後は、ICA細胞を分離・同定するために、磁気ビーズによる単離ないしは免疫細胞化学的検討を行う予定である。2. 心筋細胞機能の調節におけるICA細胞の役割:培養心室筋細胞の細胞内Ca^<2+>動態(蛍光色素indo-1)および細胞収縮(video motion detector)に対するβ遮断薬(timolol,10μM)の効果を見た。その結果、成動物由来の単離心室筋細胞と異なり、培養心室筋細胞(ニワトリ胚、新生仔ラットの両者)においては、timololは細胞収縮および細胞内Ca^<2+>濃度を低下させ、培養細胞中にカテコラミン産生細胞(ICA細胞)が存在する可能性が機能的側面からも示唆された。

本研究の目的は、最近心筋組織内にその存在が示唆されている、カテコラミンを産生ずる細胞(内在性心アドレナリン作動性[intrinsic cardiac adrenergic:ICA]細胞)の発生学的由来を同定し、機能的意義を明らかにすることであった。1. 二ワトリ胚由来培養心室筋細胞及び新生仔ラット由来培養心室筋細胞におけるICA細胞の同定:10日目のニワトリ胚あるいは生直後の新生仔ラットより心室筋細胞を単離・培養し、RT-PCR法を用いてtyrosine hydroxylase(TH)およびneuron-specific enolase (NSE)の発現について検討を加えた。その結果、ニワトリ胚および新生仔ラットの両者由来の培養心室筋細胞において、脳に比肩するTHの発現が認められた。それに対しNSEに関しては、ラットでは脳と心室筋の両者において発現が認められたが、ニワトリ胚では心室筋細胞における発現レベルは低かった。以上のデータは、これらの培養心室筋細胞においては非心筋細胞の混入が非常に少ない(<5%)というわれわれの研究室の以前のデータを考えると興味深く、ICA細胞の存在を強く示唆するものであると考える。今後は、ICA細胞を分離・同定するために、磁気ビーズによる単離ないしは免疫細胞化学的検討を行う予定である。2. 心筋細胞機能の調節におけるICA細胞の役割:培養心室筋細胞の細胞内Ca^<2+>動態(蛍光色素indo-1)および細胞収縮(video motion detector)に対するβ遮断薬(timolol,10μM)の効果を見た。その結果、成動物由来の単離心室筋細胞と異なり、培養心室筋細胞(ニワトリ胚、新生仔ラットの両者)においては、timololは細胞収縮および細胞内Ca^<2+>濃度を低下させ、培養細胞中にカテコラミン産生細胞(ICA細胞)が存在する可能性が機能的側面からも示唆された。