脳腫瘍における模型ケモカインのクローニングと解析

脑肿瘤模型趋化因子的克隆与分析

• 批准号: 10877217
• 负责人: 生塩 之敬
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877217/
• 关键词: chemokine; fractalkine; cloning; neurocytoma; ganglioglioma; medulloblastoma; グリオーマ; ケモカイン; フラクタルカイン; クローニング; 浸潤; 接着分子; EST; ライブラリースクリーニング

相同分子の多いケモカインファミリーの中で、最近単離されたCX3Cの特異的な構造および膜貫通ドメインを有するフラクタルカインについて以下の研究を行った。1)まず、フラクタルカインの相同分子が存在するのかという重要な問題に解答を出すため、ヒトグリオーマ細胞株よりcDNAライブラリーを作成し、フラクタルカインのcDNAプローブとして、マイルドな条件でスクリーニングを行ったところ、2種類の陽性cDNAクローンが単離された。しかし、塩基配列解析を行った結果、3.非翻訳領域の長さが違うのみで蛋白質コード領域は完全に一致した。従って、これら2種類のクローンは生物学的機能にはなんら違いがないものと推定された。次に手法を替えESTデータベースを用いてコンピューター上で相同性のある分子をスクリーニングしたが、既知のCCケモカインファミリーのメンバーがリストアップされたのみで、膜貫通領域を持つ新たなケモカイン分子は同定できなかった。以上より、フラクタルカインには、相同分子は存在せず、1分子で1サブファミリーを形成する特異的ケモカインであるという結論に達した。2)つぎに、フラクタルカイン分子は、ヒトおよびラットにおいて神経細胞に特異的に発現していることが最近報告されたので、神経由来の脳腫瘍におけるフラクタルカイン発現の意義について免疫組織化学的に検討した。Neurocytomaでは、8例中7例で発現が見られ、その発現は神経特異的エノラーゼとほぼ一致していた。Gangliogliomaでは、約半数(9例中5例)で発現が見られ、ganglion細胞で強陽性であった。一方、medulloblastomaでは11例中3例でのみ発現が見られたのみであった。神経分化への傾向に一致して発現の頻度は高くなったが、発現パターンはこれまでの神経細胞のマーカーとは必ずしも一致しておらず、臨床的な神経細胞の分化度を示すマーカーとしての利用が可能か、今後の検討が必要である。

The same molecular の more い ケ モ カ イ ン フ ァ ミ リ ー の で, recently 単 from さ れ た CX3C の specific な tectonic お よ び transmembrane ド メ イ ン を have す る フ ラ ク タ ル カ イ ン に つ い を line っ て following の research た. 1) ま ず, フ ラ ク タ ル カ イ ン の が same molecules exist す る の か と い う な important question に answer を out す た め, ヒ ト グ リ オ ー マ cell lines よ り cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を し, consummate フ ラ ク タ ル カ イ ン の cDNA プ ロ ー ブ と し て, マ イ ル ド な conditions で ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た と こ ろ の positive c, 2 species DNA が単 ロ ロ が単 が単 された された. し か し, salt base with column line analytical を っ た results, (3) the double の 訳 field long さ が violations う の み で protein コ ー ド field は に completely consistent し た. Youdaoplaceholder0, と れら2 species <s:1> ロ ロ <s:1> <s:1> と biological functions に なんら なんら contrary to <s:1> がな <s:1> と と presumption された. Time に technique for え を EST デ ー タ ベ ー ス を with い て コ ン ピ ュ ー タ ー で phase on same-sex の あ る molecular を ス ク リ ー ニ ン グ し た が, both known の CC ケ モ カ イ ン フ ァ ミ リ ー の メ ン バ ー が リ ス ト ア ッ プ さ れ た の み で, transmembrane domain を つ new た な ケ モ カ イ ン molecular は be で き な か っ た. Above よ り, フ ラ ク タ ル カ イ ン に は exist, the same molecular は せ ず, molecular で 1 サ ブ フ ァ ミ リ ー を form す る specific ケ モ カ イ ン で あ る と い う conclusion に da し た. 2) つ ぎ に, フ ラ ク タ ル カ イ ン molecular は, ヒ ト お よ び ラ ッ ト に お い て god 経 cells に specific に 発 now し て い る こ と が recently reported さ れ た の で, god 経 origin の 脳 swollen sores に お け る フ ラ ク タ ル カ イ ン 発 significance is の に つ い て of immunohistochemical に beg し 検 た. Neurocytoma で は, 8 cases, 7 cases で 発 が now see ら れ, そ の 発 は now god 経 specific エ ノ ラ ー ゼ と ほ ぼ consistent し て い た. Gangliogliomaで で, approximately half (5 out of 9 cases)で present が られ, ganglion cells で strongly positive であった. One side, medulloblastomaで で of 11 cases, 3 で of で み み occurrence が see られた みであった みであった God 経 differentiation へ の consistent tendency に し て 発 is の high frequency は く な っ た が, 発 パ タ ー ン は こ れ ま で の god 経 cells の マ ー カ ー と は will ず し も consistent し て お ら ず, clinical な divinely の 経 cell differentiation degrees を す マ ー カ ー と し て の may use が か, future の beg が 検 necessary で あ る.

项目成果

Toru Nishi: "Prognostic significance of the MIB-1 labeling index for patient with craniopharyngioma."International Journal of Molecular Medicine. 3. 157-161 (1999)

Toru Nishi：“MIB-1 标记指数对颅咽管瘤患者的预后意义。”国际分子医学杂志。

Tomoaki Goto: "High efficient electro-gene therapy of solid tumor by using an expression plasmid for the herpes simplex virus thymidine kinase gene."Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.. 97. 354-359 (2000)

Tomoaki Goto：“使用单纯疱疹病毒胸苷激酶基因的表达质粒对实体瘤进行高效电基因疗法。”美国国家科学院院刊.. 97. 354-359 (2000

Hideo Nakamura: "Identification of a human homolog of the Drosophila neuralized gene within the 10q25.1 malignant astrocytoma deletion region." Oncogene. 16. 1009-1019 (1998)

Hideo Nakamura：“鉴定 10q25.1 恶性星形细胞瘤缺失区域内果蝇神经化基因的人类同源物。”

Keizo Yamamoto: "Cloning and functiional chracterization of the 5'-flanking region of the human monocyte chemoattractant protein-1 receptor (CCR2) gene-Essential role of 5'-untranslated region in tissue specific expression."The Journal of Biological Chemi

Keizo Yamamoto：“人单核细胞趋化蛋白 1 受体 (CCR2) 基因 5-侧翼区域的克隆和功能表征 - 5-非翻译区在组织特异性表达中的重要作用。”《生物化学杂志》

Yukitaka Usio: "Chemotherapy for oligodendroglioma and glioma containing oligodendroglioma components." Creitical Reviews in Neursorgery. 8. 19-24 (1998)

Yukitaka Usio：“少突胶质细胞瘤和含有少突胶质细胞瘤成分的神经胶质瘤的化疗。”