权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

エンド型グリコシダーゼを用いた糖鎖の再構築とその再構築糖鎖のタンパク質の導入

使用糖苷内切酶重建糖链并引入重建糖链的蛋白质

基本信息

批准号：
11121203
负责人：
遠藤正彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.研究の目的:遺伝子工学に産生されるリコンビナントのタンパク質の糖鎖欠損を補うために、プロテオグリカンをモデルに、エンド型グリコシダーゼの糖転移活性を利用し、天然の糖鎖から生物活性を有する糖鎖に組み換えて、これをリコンビナントのタンパク質に導入する方法を確立する。2.現在までの研究の実績:1)エンド型グリコシダーゼとしてのヒアルロニダーゼの糖転移反応を機序の解明と、その至適条件下での糖鎖の組み換え法が当研究のグループによって確立されている。3.研究の成果:そこで、任意にデザインされた糖鎖配列を、天然糖鎖から組み換えにより作製する方法を検討した。そのために、1)その糖鎖の組み換えに用いられる糖鎖、すなわち糖鎖の受容体と糖鎖の供与体の組み合わせの良否について検討した。その結果、ヒアルロン酸、コンドロイチン、コンドロイチン4-硫酸、及び6-硫酸、脱硫酸化デルマタンを構成する二糖単位(ヘキスウロン酸-N-アセチンヘキソサミン)の、任意の組み換えが可能となった。2)この組み換え技術を用いて、約30種類の糖鎖を作製し、これを基質としてヒアルロニダーゼSDの基質特異性を検討し、同酵素の新しい基質特異性が発見された。3)糖鎖をタンパク質に導入するために有効な酵素、エンド-β-キシロシダーゼは、新しい調整法を工夫し、得られた酵素により、合成ペプチドを用いた糖鎖の導入法の検討が進められ、一部成功した。4.今後の課題:糖鎖の持つ様々な生物活性が知られているが、これらの高分子の糖鎖を化学合成することは不可能なので、グリコシダーゼの糖転移反応を用いた糖鎖合法が脚光をあびつつある。そこで、糖鎖の組み換え技術の様々な糖鎖への適用拡大が必要となる。更に、遺伝子工学の一つの欠点である糖鎖欠落リコンビナントのタンパク質への、糖鎖の導入法の検討が急務である。

1.Purpose of research: The research results of the legacy of engineering research Sugar lock defective をうために, プロテオグリカンをモデルに, エンド type グリコシダーゼの sugar transfer activity and utilization, natural sugar lock and biological activity and group of sugar lockみchangeえて、これをリコンビナントのタンパクqualityに ImportするmethodをEstablishmentする. 2. Current achievements in research and development: 1) エンド type グリコシダーゼとしてのヒアルロニダーゼのsugar転提远をThe machine sequence has been explained and the method of changing the sugar lock group under the appropriate conditions has been studied and established. 3. Research results: そこで, arbitrary にデザインされたsugar lock combination sequence を, natural sugar lock から group み change えにより production method するを検 Discussion した.そのために、1)そのsugar lockの groupみchangeえに用いられるsugar lock、すなわちThe recipient of the sugar lock and the donor and body of the sugar lock are both together and in good condition.そのRESULT, ヒアルロン acid, コンドロイチン, コンドロイチン4-sulfuric acid, and び6-sulfuric acid, desulfated デルマタンをConstitutes the する disaccharide unit (ヘキスウロン acid-N-アセチンヘキソサミン)の, and any combination of み and えが is possible. 2) この组みchangeえを用いて, about 30 kinds of sugar locks, これをsubstrate としてヒアルロニダーゼSDの matrix specificityを検し, homozymeの新しい matrix specificityが発见された. 3) Sugar-locking enzymes are introduced into effective enzymes, enzymes, enzymes, and new adjustment methods. Kungfu, getting enzymes, synthesizing enzymes, using sugar locks, introducing methods, and making a success. 4. Future topics: Chemical synthesis of sugar locks and high molecular weight sugar locks with biological activityすることはimpossibleなので、グリコシダーゼのsugar転movablereverse応を用いたsugarlocklegalが Footlightをあびつつある.そこで、sugar lock no group み change え technology の様々なsugar lock へのapplicable 拡大がとなる. Update, the remaining の子工学の一つの无点であるsugar lock owed リコンビナントのタンパクquality への, the sugar lock の Import method の検 Discussion がurgical business である.