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近接場光を用いた生体機能分子の分子構造変化の観察と制御

利用近场光观察和控制生物功能分子的分子结构变化

基本信息

批准号：
11122211
负责人：
辰巳仁史
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11122211/
关键词：
近接場光イメージング成長円錐 GFP シナプスカルシウム開口放出

项目摘要

本研究では、生命現象にとって大切な分子を、細胞内で"機能する状態"そのままに、その動的変化を近接場光を用いて研究する。研究対象とする分子は神経細胞の情報の受け渡しを行うシナプスの機能を担っている蛋白質シナプトタグミンである。シナプスとは神経細胞の間の情報を受け渡しする場所である。脳における情報処理の根幹は、シナプスによる情報の受け渡しにあるとされる。シナプトタグミンはこのシナプスにあって情報の担い手である伝達物質を貯えている小胞の膜に存在し伝達物質を神経細胞が放出するときに重要な役割をになっていると考えられている。この蛋白質分子に遺伝子工学の技術を用いて蛍光を発するアミノ酸配列(GFP)を付け加えて、蛍光シナプトタグミンを作った。この技術は近接場をはじめとする細胞イメージングにとって極めて重要である。すなわち生命現象を担う大切な分子をことごとく蛍光蛋白質分子に変えることができ、生きた細胞で観察することができるからである。全反射モードの近接場顕微鏡を構成し、培養細胞で発現した蛍光シナプトタグミンを、生きた細胞の中で、全反射型近接場光顕微鏡で観察ができた。このようにして近接場光で観察している細胞を興奮するように化学的な刺激を与えると、細胞内カルシウムイオン濃度の上昇がみられ、それとともに斑点状にGFPの蛍光が変化することが見出された。この斑点状の蛍光変化の意味の検討を行うために、細胞からの伝達物質の放出の標識色素FM464を細胞に導入して、伝津物質の放出とシナプトタグミンGFPの蛍光変化の関係を検討した。その結果、伝達物質の放出に伴なってGFPの蛍光変化がおこることが明らかになった。

The purpose of this study is to study the molecular structure, the mechanism, the state of the cell, the chemical reaction and the photosensitivity of the animal. In the study, the molecular mechanism is responsible for the growth of protein, and protein. The relationship between the parents and the parents is subject to the treatment of the ferry workers. I don't know what to do. I don't know. I don't know. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. The technology of protein molecular engineering and technology is based on the use of light-emitting acid (GFP), light-emitting gas, and light-emitting gas. In the near field of technology and technology, we should pay more attention to the importance of technology and technology. Life is like a big cut of the molecules, the light proteins, the molecules, the cells, the cells, the cells. The total reflection sensor is close to the micrometer, the cell is sensitive to light, the cell is in the center of the cell, and the total reflection proximity field is sensitive to light. The proximity of the light was observed in the cells. The chemical stimuli and stimuli were detected in the cells. The intracellular stimuli were not detected in the cells. In the degrees, the spots were spotted and the light was changed. The blotchy light means that the color of the FM464 is released, the color of the cell is released, and the GFP is released. According to the results, you can see that you are going to have a problem with GFP lighting.