標的指向性を付与したウイルス様超分子集合体によるアンチセンスDNAターゲティング

使用具有靶向性的病毒样超分子组装体进行反义 DNA 靶向

• 批准号: 11132207
• 负责人: 原田 敦史
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11132207/
• 关键词: アンチセンスDNA; ポリイオンコンプレックスミセル; ブロック共重合体; 核酸分解酵素耐性; ポリエチレングリコール; ポリ-L-リシン; 標的指向性; キャピラリーゲル電気泳動

(1)アンチセンスDNA内包高分子ミセル型ベクターの物理化学的特性評価及び核酸分解酵素に対する安定性評価:ポリ-L-リシン重合度の異なるポリエチレングリコール-ポリ-L-リシンブロック共重合体を合成し、アンチセンスDNAを内包したポリイオンコンプレックス(PIC)ミセルを調製した。得られたPICミセルの粒径は、antisense DNAの長さには影響されないが、ポリ-L-リシン連鎖鎖長に依存して変化することが確認された。また、PICミセル内核に250本程度のアンチセンスDNAは保持していることが確認された。さらに、物理化学的諸特性の明らかとなったPICミセルについてアンチセンスDNAベクターとしての機能評価のために核酸分解酵素に対する耐性をキャピラリーゲル電気泳動により評価した。その結果、物理化学特性と同様ブロック共重合体のポリ-L-リシン重合度によって核酸分解酵素耐性が制御可能であることが示唆された。(2)標的指向性分子を導入可能な末端官能基を有するブロック共重合体の合成及び標的指向性分子の導入:標的指向性分子導入可能なカチオン性ブロック共重合体として、PEG末端に反応性可能基(アルデヒド基)を有するアルデヒド-PEG-ポリジメチルアミノエチルメタクリレートブロック共重合体の合成し、このブロック共重合体末端のアルデヒド基とp-aminophenyl一β,D-lactopyranosideを反応させることによって、末端アルデヒド基に標的指向性分子としてラクトース誘導体を共有結合を介して導入することに成功した。

(1) ア ン チ セ ン ス DNA insourcing polymer ミ セ ル type ベ ク タ ー の 価 physical and chemical characteristics of evaluation and び nucleic acid decomposition enzyme に す seaborne る stability evaluation 価 : ポ リ - L - リ シ ン coincidence degree の different な る ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル - ポ リ - L - リ シ ン ブ ロ ッ ク weigh fit を synthetic し, ア ン チ セ ン ス DNA を insourcing し た ポ リ イ オ ン Youdaoplaceholder0 セ プレッ ス ス ス(PIC) プレッ セ を を modulation た た. Have ら れ た PIC ミ セ ル は の particle size, and antisense DNA の long さ に は influence さ れ な い が, ポ リ - L - リ シ ン long chain lock に dependent し て variations change す る こ と が confirm さ れ た. ま た, PIC ミ セ ル kernel に 250 degree の ア ン チ セ ン ス DNA は keep し て い る こ と が confirm さ れ た. さ ら に, the characteristics of physical and chemical の Ming ら か と な っ た PIC ミ セ ル に つ い て ア ン チ セ ン ス DNA ベ ク タ ー と し て の function evaluation 価 の た め に nucleic acid decomposition enzyme に す seaborne る patience を キ ャ ピ ラ リ ー ゲ ル electric 気 swimming に よ り review 価 し た. そ の results with others, physical and chemical characteristics と ブ ロ ッ ク weigh fit の ポ リ - L - リ シ ン coincidence degree に よ っ て nucleic acid decomposition enzyme patience が suppression may で あ る こ と が in stopping さ れ た. (2) the underlying molecular を directivity import may end な faculties base を す る ブ ロ ッ ク weigh fit の directivity synthesis and び target molecules の import: mark directivity molecules may import な カ チ オ ン sex ブ ロ ッ ク weigh fit と し て, PEG end に anti 応 may base (ア ル デ ヒ ド) を have す る ア ル デ ヒ ド - PEG - ポ リ ジ メ チ ル ア ミ ノ エ チ ル メ タ ク リ レ ー ト ブ ロ ッ ク weigh fit の synthetic し, こ の ブ ロ ッ ク weigh fit end の ア ル デ ヒ ド と p - aminophenyl a beta, D - lactopyranoside を anti 応 さ せ る こ と に よ っ て, end ア ル デ ヒ ド base directivity に target molecules と し て ラ ク ト ー ス inductor を By combining を and て て to import する する とに, successfully <s:1> た.

项目成果

K. Kataoka, A. Harada, D. Wakeyayashi, Y. Nagasaki: "Polyion Complex Micelles with Reactive Aldehyde Groups on Their Surface from Plasmid DNA and End-Fictionalized Charged Block Copolymers"Macromolecules. 32(20). 6892-6894 (1999)

K. Kataoka、A. Harada、D. Wakeyayashi、Y. Nagasaki：“来自质粒 DNA 和末端虚构带电嵌段共聚物的表面具有反应性醛基的聚离子复合胶束”大分子。

A. Harada, H. Togawa, K. Kataoka: "Physicochemical Properties and Nuclease Resistance of antisense0Oligonucleotides entrapped in the Core of polyion Complex Micelles Composed of Poly (ethylene Glycol)-Poly(L-lysine) Block Copolymers"European Journal of Ph

A. Harada、H. Tokawa、K. Kataoka：“由聚（乙二醇）-聚（L-赖氨酸）嵌段共聚物组成的聚离子复合胶束核心中捕获的反义寡核苷酸的物理化学性质和核酸酶抗性”欧洲哲学杂志