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熱帯熱マラリア原虫の抗原遺伝子多型解析と培養系における適応制御因子に関する研究

恶性疟原虫抗原基因多态性分析及培养体系适应性控制因素研究

基本信息

批准号：
11147212
负责人：
川本文彦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)SERA抗原遺伝子多型と地理的分布インドネシア(35株)とミャンマー(12株)から得られた47野生分離株についてSERA抗原遺伝子の多型解析を行い、この内インドネシアの20株は全てFCR-3型、ミャンマーの9株も全てK-1型と判り、従来の地理的分布結果と一致していた。また、18アレルに分類されていた前半部オクタマーリピート(OR)部位は、47株の内43株はI-V型で占められていたが、両国から各々2つの新しいアレルが見いだされ、OR部位は合計22型に分類された。(2)CS抗原遺伝子のC末端非反復配列領域の変異ミャンマーから得られた21株を用いて、CS抗原遺伝子のTh2RとTh3Rの2つのT cellエピトープを含むC末端非反復配列領域の多型解析を行った結果、2株から新型のアレル2型が見いだされた。また、1株はベトナムから見いだされた新型アレルと同じであったが、残りはすべて既存型(I型、III型、V型)と判明し、ベトナム分離株における多型性がクローズアップされた。(3)熱帯熱マラリア原虫の野生分離株の人工培養への適応と生殖母体形成ミャンマーから分離した野生分離株の人工培養適応株を用いて検討した結果、寄生率が5%を越えた時に、ヘマトクリット値を高めて培養することで生殖母体の形成誘導に成功した。野生分離株により生殖母体転換率に差が認められたが、M-228株は多数の生殖母体(stageIV-V)を形成することが判明した。寄生率は10%程度を維持しながら生殖母体は約70-90%に達し、大半の原虫が培養中に有性世代に転換したことを示す。また、別の株(A-2)では長期間に渡り培養した結果、生殖母体形成能が消失する現象も確認された。

The main results were as follows: (1) Geographic distribution of SERA antigens polymorphism (35 strains), sera antigens (12 strains), sera antigens (47 wild isolates), sera antigens (20 strains), whole K1 (9 strains), and geographical distribution (12 strains). In the first half of the test, 43 strains of type I-V in 47 strains, 2 in each of the 47 strains, and 22 in each part of the country were classified into OR, 18 and 22 respectively. (2) A total of 21 strains of CS antigens were obtained by C-terminal non-reversed alignment of CS antigens. The results of polymorphisms analysis of C-terminal non-trans-aligned field fragments of CS antigens, Th2R antigens, T cell antigens, and 2 novel clones were found in this study. The new type was the same as that of the existing type (type I, type III, type V), and the strain was divided into polymorphisms. (3) the wild isolates of protozoa were cultured artificially, the reproductive mother was formed, the reproductive mother was formed, the wild isolates were isolated, and the parasitism rate was more than 50%. The parasitism rate was over 50%. The reproductive mother (stageIV-V) of most of the 228 wild isolates were identified as reproductive mother. The parasitism rate of 10% maintains about 70-90% of the reproductive mother, and more than half of the protozoa have sexual generations in culture. The results of long-term incubation and reproductive matrix formation of Amur2 and other strains (Amur2) confirmed that the reproductive mother could disappear.