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植物の硝酸代謝において亜硝酸還元酵素は必須酵素と言えるか?

亚硝酸还原酶是植物硝酸盐代谢中必需的酶吗？

基本信息

批准号：
11151223
负责人：
森川弘道
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

亜硝酸還元酵素(NiR)は、高等植物の葉や根における硝酸還元の第二番目の酵素であり、NiRは亜硝酸→アンモニア還元反応を触媒する必須の酵素である。しかし、申請者はNiR活性を大幅に欠損したタバコ(NiRcDNAをアンチセンス方向に発現させNiRのmRNAを欠く)が(少なくとも8時間-2週間の間では)野生株と同程度の硝酸還元能を持つことを示す事実を発見した。本研究は、「NiRは亜硝酸→アンモニア還元反応を触媒する必須の酵素であるか」を目的とし、本年度以下の成果を得た。NiRcDNAをアンチセンス方向に発現させたタバコclone271の葉や根のNiR活性は検出限界に等しく、またノザン分析ではNiRmRNAを検出できないとの結果を得た。clone271の硝酸同化量(8時間-2週間栽培)は野生株と同程度であった。また、野生株に匹敵する重窒素ラベルのアンモニアの生成が認められた。これらの結果は、本クローンが、亜硝酸還元酵素活性が野生株に比して大幅に低下しているにもかかわらず、野生株と同程度の硝酸還元能を持っていること、またその代謝産物としてアンモニアを生成することを示すものである。NiR酵素の活性染色を行い、野生株とclone271の両者において、NiR酵素活性を示すバンドが少なくとも二本検出され、両バンドの電気泳動移動度は、野生株とclone271の両者で、ほぼ一致した。この内一つのバンドは、抗NiR抗体と反応した。この結果はclone271において、「残留」NiR酵素が存在することを示唆するものである。野生株とclone271において、抗SiR抗体と反応する明瞭なバンドが一つ検出されたが、このバンドは、上述のNiR以外のもう一つの活性染色バンドと一致すると断定できず、さらに詳細な研究が必須である。

Reductase nitrate (NiR), nitrate reductase, nitric acid, nitric acid, nitric acid, The NiR activity of both the applicant and the applicant was significantly lower than that of the wild strain (8-2 min after the NiRcDNA exposure). The wild strain could hold the same level of nitric acid in the same degree. In this study, NiR, nitric acid, nitric acid In the direction of NiRcDNA test, the results show that the activity of NiR is out of the limit, the activity of NiR is out of the limit, and so on. The results of NiRmRNA analysis show that the results are good. The amount of nitric acid assimilation of clone271 (cultivated in 8 time-2 hours) was similar to that of wild plants. The wild and wild plants were infected with asphyxiate, asphyxiant, asphyxiate, asphyxitin, asphyxium, asphyxium, asphy The results showed that the activity of nitrate reductase in the wild plant was significantly lower than that in the wild plant, and the wild plant was able to maintain the activity of nitric acid in the same degree. The results showed that the wild strain was significantly lower than the wild plant in the same degree. NiR enzyme activity staining test, wild strain clone271 test, NiR enzyme activity assay showed that there was no significant difference in the number of ordinary universities, the mobility of electrophoretic mobility in ordinary universities, the mobility of clone271 in wild plants, and the same in wild strains. The anti-NiR antibody was negative in the serum. The results showed that the presence of clone271 enzyme and "residual" Nir enzyme showed that there was a significant increase in Nir enzyme concentration. The wild clone271 strains, anti-SiR antibodies, anti-DNA antibodies and anti-DNA antibodies were determined.

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Naoki Goshima: "Emission of nitrous oxide (N_2O) from transgenic tobacco expressing antisense NiR mRNA"Plant Journal. 19. 75-80 (1999)

Naoki Goshima：“表达反义 NiR mRNA 的转基因烟草释放一氧化二氮 (N_2O)”《植物杂志》。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Hiromichi Morikawa: "Air Pollution and Biotechnology in Plants"Springer-Verlag (in press). (1999)

Hiromichi Morikawa：“空气污染和植物生物技术”Springer-Verlag（印刷中）。

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发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
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通讯作者：
Morikawa et al.