シャペロンCdc37の機能解析

伴侣Cdc37的功能分析

• 批准号: 11153230
• 负责人: 木村 洋子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11153230/
• 关键词: Cdc37; タンパク質キナーゼ; ポリグルタミン; 出芽酵母; 凝集体; hsp104

分子シャペロンCdc37のタンパク質キナーゼに作用する部位を調べるために、出芽酵母を用いたアッセイ系を確立した。すなわち、野生株の出芽酵母にp60^<v-src>の遺伝子を発現させると、p60^<v-src>の高いチロシンキナーゼ活性により酵母は死ぬ。ところがhsp90の変異株ではチロシンキナーゼ活性が保たれず、酵母は生育する。これに、Cdc37遺伝子を大量発生させると、チロシンキナーゼが回復し、酵母は生育できなくなることがわかった。そこで、ランダムな変異をCdc37導入し、酵母が再び生育できる変異体のスクリーニングを試みている。さらに、ポリグルタミンによる凝集体形成や細胞障害機構を解明するために、出芽酵母にポリグルタミンを発現させる系を構築した。出芽酵母中でもポリグルタミンは長さにと発現量に依存して凝集体を形成し、また、ポリグルタミンの長さに依存して生育に若干の遅れを生じた。次に、分子シャペロンの変異株で、凝集体形成の変化を調べた。すると、hsp104の欠損変異株では、凝集体形成がみられなくなり、さらにポリグルタミンは可溶性になり、凝集体の形成にHsp104が関わっていることがわかった。さらに、酸化ストレスによって、凝集体形成の促進が見られた。現在、ポリグルタミンを発現しているhsp104の変異株から可溶性抽出物をとり、培養細胞の抽出物を加え、in vitroで再び凝集体形成がみられないかを検討している。

The molecular structure of CdC37 was studied. The p60 gene of budding yeasts from wild and wild strains <v-src>was found to be highly active<v-src>. Hsp90 is a mutant strain that maintains its activity and produces yeast. Cdc-37 gene is produced in large quantities, and yeast is produced in large quantities. Cdc37 introduction, yeast reproduction, heterosis, heterosis In addition, the formation of aggregates and the development of cell barrier mechanisms are also discussed. In budding yeasts, the growth of the cell depends on the production of aggregates, and the growth of the cell depends on the production of several aggregates. Subspecies, molecules, and aggregate formation are regulated. Hsp104 is related to the formation of soluble and condensed aggregates. In addition, the promotion of coagulation and coagulation formation is also observed. Now, the soluble extract from the mutant strain of hsp104 has been discovered, the extract from cultured cells has been added, and the re-aggregates have been formed in the vitro.