発癌マウスを用いた抗癌剤、放射線による癌治療の分子メカニズムの解析

Murine-αA-crystallin promotorによりSV40 T antigensをマウス水晶体上皮に発現させ、扁平上皮癌を発生するαT3トランスジェニックマウスとp53ノックアウトマウスを交配することにより、マウスの内因性p53が野生型(+/+)、ヘテロ欠損型(+/-)、ホモ欠損型(-/-)をそれぞれ有する腫瘍発生マウスモデルを作製した。妊娠16日及び17日目のトランスジェニックマウスにトポイソメラーゼIインヒビターであるCPT-11を400mg/kg及び200mg/kg腹腔内投与し、2日後開腹を施行し胎児を摘出し、仔マウス水晶体腫瘍のHE染色による組織学的解析ならびにTUNEL染色によりアポトーシス誘導の解析を行った。p53野生型水晶体腫瘍に対して400mg/kg投与群は17.5%、200mg/kg投与群は7.8%、生理食塩水投与群は1.8%腫瘍細胞にアポトーシスを誘導した。トポイソメラーゼIインヒビター(CPT-11)は濃度依存性にマウス扁平上皮癌にアポトーシス誘導した。また400mg/kg投与群の水晶体腫瘍を観察するとp53の遺伝子背景が野生型では17.5%、ヘテロ欠損型では6.8%、ホモ欠損型では3.6%の腫瘍細胞にアポトーシス誘導した。CPT-11によって誘導されたアポトーシスは主にp53遺伝子量依存性を示した。しかしながら、p53遺伝子の欠損する扁平上皮癌にも3.6%アポトーシスを誘導した。つまりトポイソメラーゼIインヒビターであるCPT-11は癌抑制遺伝子p53を介してアポトーシスを誘導する経路とp53遺伝子を介さないでアポトーシスを誘導する経路とがあることが明らかとなった。

Murine-αA-crystallin promotorによりSV40 T antigensをマウス水晶体上皮に発現させ、扁平上皮癌を発生するαT3トランスジェニックマウスとp53ノックアウトマウスを交配することにより、マウスの内因性p53が野生型(+/+)、ヘテロ欠損型(+/-)、ホモ欠損型(-/-)をそれぞれ有する腫瘍発生マウスモデルを作製した。妊娠16日及び17日目のトランスジェニックマウスにトポイソメラーゼIインヒビターであるCPT-11を400mg/kg及び200mg/kg腹腔内投与し、2日後開腹を施行し胎児を摘出し、仔マウス水晶体腫瘍のHE染色による組織学的解析ならびにTUNEL染色によりアポトーシス誘導の解析を行った。p53野生型水晶体腫瘍に対して400mg/kg投与群は17.5%、200mg/kg投与群は7.8%、生理食塩水投与群は1.8%腫瘍細胞にアポトーシスを誘導した。トポイソメラーゼIインヒビター(CPT-11)は濃度依存性にマウス扁平上皮癌にアポトーシス誘導した。また400mg/kg投与群の水晶体腫瘍を観察するとp53の遺伝子背景が野生型では17.5%、ヘテロ欠損型では6.8%、ホモ欠損型では3.6%の腫瘍細胞にアポトーシス誘導した。CPT-11によって誘導されたアポトーシスは主にp53遺伝子量依存性を示した。しかしながら、p53遺伝子の欠損する扁平上皮癌にも3.6%アポトーシスを誘導した。つまりトポイソメラーゼIインヒビターであるCPT-11は癌抑制遺伝子p53を介してアポトーシスを誘導する経路とp53遺伝子を介さないでアポトーシスを誘導する経路とがあることが明らかとなった。