細胞機能制御用マイクロカルシウムコントローラー

用于细胞功能控制的微钙控制器

• 批准号: 11875174
• 负责人: 松岡 英明
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11875174/
• 关键词: 単一細胞; カルシウムイオン濃度; カルシウム濃度

本研究は、単一細胞レベルの空間で、細胞内分布、時間変化モードの二つの視点でCa^<2+>濃度を精密に制御できる実験系を開発することを究極の目的としている。本年度は最終年度であり、マルチチャンネル型キャピラリー製作技術の向上、マイクロ水滴への電気泳動的Ca^<2+>導入実験を行う。具体的な項目を以下に示す。1.マルチチャンネル型キャピラリー先端形状の精密制御:昨年度までの結果で、プラーの加熱条件(加熱力、引張力)を変えることで、先端形状を制御できることはわかっていたが、再現性という点に問題があった。そこで、作製したマルチチャンネル型キャピラリーのインピーダンスを解析することで、均一な先端形状のキャピラリーが作製できた。この形状は、走査型電子顕微鏡により確認した。2.マイクロ水滴を用いた電気泳動的Ca^<2+>導入量制御実験:昨年度に得られた結果に基づき、シリコンオイル中にCa^<2+>感受性蛍光色素(Fura-2)を含むカルシウムバッファー(50nM〜50μM)を調製し、Ca^<2+>濃度と蛍光強度比の検量線を作成した。その結果、100nM〜50μMの間で、直線的な関係が得られた。次に3チャンネル型キャピラリーに250mMCaCl_2溶液を充填し、1nAの定電流で電気泳動的にCa^<2+>を導入した。その結果、電場印加時間を10分、20分、30分と増やすことで、Ca^<2+>の導入量も300nM、550nM、900nMと増加した。植物細胞を用いた実験を行うには至らなかったが、以上のことから、電気泳動的にCa^<2+>導入を制御することができるシステムを構築できたと考えられた。

The purpose of this study is to determine the accuracy of the system in terms of space, intracellular distribution, and time, temperature, temperature and temperature. This year, the most recent year of the year, the technology is improved, and the Ca ^ & lt;2+> of water droplet electrophoretic swimming is introduced into the industry. The specific "items" are shown below. 1. The precision control of the front-end shape: the results of the last year, the conditions (plus force, lead-force), the front-end shape, the precision control of the front-end shape. This is the first time to analyze and unify the shape of the front end. Please check the shape of the computer, the walking computer and the micro-computer. two。 The water droplet is controlled by the amount of Ca ^ & lt;2+> used in electrophoretic electrophoresis. the results obtained last year show that the sensitivity of Ca ^ & lt;2+> photopigment pigments (Fura-2) in the electrophoretic electrophoretic system (50nM50 μ M) is sensitive to the concentration of Ca ^ and lt;2+>. The result of the experiment is 100nM50 μ M, and the straight line is successful. In the second half of the year, the 250mMCaCl_2 solution was filled and the Ca ^ & lt;2+> of the 1nA fixed current electrophoretic electrophoresis was injected into the battery. The results of the test, 10 minutes, 20 minutes and 30 minutes of the Inca time, and the consumption of 300nM, 550nM and 900nM were added to 300nM, 550nM and 900nM. The plant cell does not need to pay attention to the environmental pollution, the above equipment and the electrophoretic activity of calcium ^ & lt;2+> are used to control the equipment.

项目成果

斉藤美佳子: "バイオミメティックスハンドブック"エヌ・ティー・エス. 6 (2000)

齐藤美佳子：《仿生学手册》NTS 6 (2000)。

Katsuya Yamada: "Measurement of glucose uptake and intracellular calcium concentration in single, living pancreatic β-cells"J.Biol.Chem.. 275(29). 22278-22283 (2000)

Katsuya Yamada：“单个活胰腺 β 细胞中葡萄糖摄取和细胞内钙浓度的测量”J.Biol.Chem.. 275(29) (2000)。

Hideaki Matsuoka: "Effects of a pulsing electric signal on the Cross Membrane Potential and the Cell Division Potentiality of a Single Cell of Tabacco."Bioelectrochem. Bioenerg.. 49. 65-72 (1999)

Hideaki Matsuoka：“脉冲电信号对烟草单细胞跨膜电位和细胞分裂电位的影响。”生物电化学。

Mikako Saito: "pH-Microelectrode-micropiprttr system for the measurement of Enzyme Reaction in Picoliter Space of a Living Plant Cell."Anal. Chim. Acta. 404(2). 223-229 (2000)

Mikako Saito：“pH-微电极-micropiprttr 系统，用于测量活植物细胞皮升空间中的酶反应”。