cDNAアレイを用いた慢性関節リウマチ滑膜発現遺伝子プロファイルの解析

使用 cDNA 芯片分析类风湿性关节炎滑膜表达基因谱

• 批准号: 11877080
• 负责人: 土屋 尚之
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877080/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; 滑膜; 遺伝子発現

1.モデル系として、培養末梢血単球に種々のサイトカインを加えて分化し、その前後におけるmRNA発現を、cDNAアレイを用いて検出した。従来放射性同位元素標識のプローブが用いられていたが、今回の研究により蛍光標識プローブを用いる検出系を確立し得た。2.慢性関節リウマチ(RA)13例、変形性関節症(OA)6例の膝関節滑膜よりRNAを調整した。これらを用いたdifferential display法により、RA滑膜において多くの遺伝子断片の優先的な発現が見出された。それらの断片の塩基配列を決定したところ、それらのうちにはfollistatin-related protein,meningioma expressed antigen,inhibitor of differentiationなどの遺伝子が含まれることが明らかになった。これらを標的遺伝子として、mRNAを定量するため、競合的合成内部標準DNAを用いた定量的RT-PCR系を確立した。定量の結果、これらの遺伝子の多くにおいて、実際に大部分のRA患者滑膜において、OA患者と比較してmRNA量が増加していることが確認された。3.現在、滑膜より精製したpoly A+ RNAを用い、上述の蛍光標識プローブを用いたcDNAアレイによる解析を施行中である。今後、上述の定量的RT-PCRの結果との対応を確認した上で、全ての滑膜検体についてcDNAアレイを用いた解析を進める予定である。

1. The expression of mRNA and cDNA in cultured peripheral blood cells was detected by PCR. Since the use of radioactive isotope labeling tools has been established in the past, the detection system of radioactive isotope labeling tools has been established in this research. 2. 13 cases of chronic arthritis (RA), 6 cases of osteoarthritis (OA), and 13 cases of chronic arthritis (RA). The differential display method is used to detect the presence of multiple fragments of RA synovium. The sequence of fragments is determined by follistatin-related protein,meningioma expressed antigen,inhibitor of differentiation. A quantitative RT-PCR system was established for this purpose. The quantitative results showed that the number of genes in synovial tissue increased in most patients with RA and in comparison with OA. 3. Now, we're refining poly A+ RNA, and we're analyzing the cDNA. In the future, the quantitative RT-PCR results will be confirmed and analyzed in the synovial system.