プロスタシンの増殖作用の研究および早期腫瘍マーカーとしての有用性の研究

前列腺素的增殖作用及其作为早期肿瘤标志物的用途的研究

• 批准号: 11877177
• 负责人: 冨田 公夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877177/
• 关键词: セリンプロテアーゼ; プロスタシン; クローニング; 細胞増殖; 癌; 腎癌; 膀胱癌; 尿

私達はラット腎臓より新しいセリンプロテアーゼであるプロスタシンのcDNAクローニングに成功した。このセリンプロテアーゼはヒトおよびラットにおいて腎臓・膀胱・前立腺に強く発現し、その他大腸、胃、肺、皮膚に低レベルの発現を認めた。また、抗プロスタシン抗体による免疫染色では上皮細胞管腔側の細胞膜に発現を認め、さらに尿中にも存在を認めている。プロスタシンに類似のヘプシンが肝臓やヒト肝細胞癌細胞株に多く発現し、その細胞増殖に関与することが証明されていることより腫瘍性増殖に関与している可能性が高い。これらのことより私達はこのプロスタシンの腎臓および膀胱の上皮細胞に対する細胞増殖作用、さらに血中・尿中のプロスタシンのアッセイ系を確立するために、まずプロスタシンのカルボキシ末端付近のアミノ酸配列に基づいてペプチドを合成し、ウサギに免疫を行い高力価の抗体を作製した。現在のところ、ポリクローナル抗体の2種類が得られ、その特異性を検討している。尿中におけるプロスタシン排泄の動態を検討したところ、男性にも女性にも確認された。プロスタシンが前立腺に多く存在することより尿中ヘの精液の混入がアッセイ系への干渉が心配されたが、アッセイ系への問題は少ないものと考えられる。また、血尿、蛋白尿の影響についても検討中である。さらに、特異性の高いマウスモノクローナル抗体を作製し、RIAまたはELISAアッセイ系を確立する準備を進めている。現在のところ、アッセイ系はまだ道半ばであるが、進行癌患者において尿中のプロスタシン排泄量が多いという感触を得ている。さらに症例数を重ねて検討する。また高感度のアッセイ系を確立し血中濃度の測定も検討する。

Private da は ラ ッ ト renal viscera よ り new し い セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ で あ る プ ロ ス タ シ ン の cDNA ク ロ ー ニ ン グ に successful し た. こ の セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ は ヒ ト お よ び ラ ッ ト に お い て routine kidney, bladder, top made gland に く 発 し, そ の his colon, stomach, lung, skin に low レ ベ ル の 発 を now recognize め た. ま た, resisting プ ロ ス タ シ ン antibody に よ る immune dyeing で は epithelial cell lumen side の membrane に 発 を now recognize め, さ ら に urine に も exist を recognize め て い る. プ ロ ス タ シ ン に similar の ヘ プ シ ン が routine liver や ヒ に ト hepatocellular cancer cells more く 発 し, そ の cells raised colonization に masato and す る こ と が prove さ れ て い る こ と よ り swollen sores sexual rights colonization に masato and し て い が high い る possibilities. こ れ ら の こ と よ り private da は こ の プ ロ ス タ シ ン の renal viscera お よ の び bladder epithelium に す seaborne る cells raised colonization, さ ら に blood, urine の プ ロ ス タ シ ン の ア ッ セ を イ department establish す る た め に, ま ず プ ロ ス タ シ ン の カ ル ボ キ シ end paying nearly の ア ミ ノ acid with column に base づ い て ペ プ チ ド を synthetic し, ウ サ ギ に immune を line Youdaoplaceholder0 high-strength 価 <s:1> antibody を preparation of た. Now の と こ ろ, ポ リ ク ロ ー ナ ル antibody の 2 kinds が must ら れ, そ の specificity を beg し 検 て い る. The dynamics of におけるプロスタシ <s:1> excretory glands in urine を検 seek たと たと ろ ろ, male に <s:1> female に された confirm された. プ ロ ス タ シ ン が front gland に す more く る こ と よ り urine ヘ の semen の mixed with が ア ッ セ イ department へ の dry involved が heart with さ れ た が, ア ッ セ イ department へ の は less problems な い も の と exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0, hematuria and proteinuria have an impact on に, て, 検 and である. さ ら に, high specificity の い マ ウ ス モ ノ ク ロ ー ナ ル し the antibody を cropping, RIA ま た は ELISA ア ッ セ を イ department establish す る prepare を into め て い る. Now の と こ ろ, ア ッ セ イ department は ま だ way half ば で あ る が, for cancer patients に お い て urine の プ ロ ス タ シ ン excretion が more い と い う feeling を must て い る. The number of cases of さらに is を and ねて検. Youdaoplaceholder0 high sensitivity <s:1> アッセ is を to establish the determination of blood concentration <s:1> in the blood 検 to seek する.

项目成果

Tabuchi S. et al: "Regulation of genes for inducible nitric oxide synthase and urea cycle enzymes in rat liver in endotoxin shock."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 268. 221-224 (2000)

Tabuchi S. 等人：“内毒素休克中大鼠肝脏中诱导型一氧化氮合酶和尿素循环酶基因的调节”。Biochem.Biophys.Res.Commun. 268. 221-224 (2000)

Adachi M. et al: "Activation of epithelial sodium channels by prostasin in Xenopus Oocytes."J.Am.Soc.Nephrol.. (in press).

Adachi M. 等人：“爪蟾卵母细胞中前列腺素激活上皮钠通道。”J.Am.Soc.Nephrol..（正在出版）。

Miyoshi T. et al: "Expression of an mNSC1 in mammalian cells."Biochem.Biophys.Res.Commun. 265. 13-17 (1999)

Miyoshi T. 等人：“哺乳动物细胞中 mNSC1 的表达”。Biochem.Biophys.Res.Commun。

Kitamura K. et al: "Endothelin-B receptors activate Galpha13."Am.J.Physiol.. 276. c930-c937 (1999)

Kitamura K. 等人：“内皮素 B 受体激活 Galpha13”。Am.J.Physiol.. 276.c930-c937 (1999)

Nakayama Y et al: "Intranephron distribution and regulation of endothelin converting enzyme-1 cyclosporine A-induced acute renal failure in rats."J.Am.Soc.Nephrol.. 10. 562-571 (1999)

Nakayama Y 等人：“内皮素转化酶 1 环孢菌素 A 诱导的大鼠急性肾衰竭的肾内分布和调节。”J.Am.Soc.Nephrol.. 10. 562-571 (1999)