中枢神経系病変に対する遺伝子治療

中枢神经系统病变的基因治疗

• 批准号: 11877244
• 负责人: 林 明宗
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877244/
• 关键词: 遺伝子銃; 脳; 遺伝子導入; グリオーマ; 神経細胞; GFP; lac Z; lacZ

2種類の遺伝子銃による遺伝子導入法を検討した。遺伝子銃は、金粒子の表面にDNAを付着させ、ヘリウムガスの圧力で加速し、遺伝子を細胞内に導入する装置である。使用機器は、新型の機械である日本医科機械製PIGG-3と従来型のBiorad製Heliosであり、培養グリオーマ細胞に遺伝子導入を試みた。後者は、ガスが直接対象に衝撃を与えるため、細胞傷害性が強く、最低の圧に設定しても中心部の細胞は、大部分が消失したのに対し、前者では、ガスの圧力がハンマー弾、振動板を介して、金粒子を加速する仕組みなため、細胞傷害性が非常に少ないことがわかった。細胞膜に対する貫通力は後者の方がおとるため、念のため走査電子顕微鏡で調べたところ、細胞内に金粒子が入っていることが確認された。次にこの新型機器を用い、reporter geneとして、GFPまたはlacZをin vitroでグリオーマ細胞、神経細胞に導入し、発現することを確かめた。グリオーマ細胞ではほぼ100%、神経細胞では30%の導入効率であった。また、脳のスライスカルチャーにも導入が確認された。さらに、in vivoの実験ではラットを麻酔下で開頭し、硬膜を除去し、GFPを導入し、発現を確認した。導入による脳表の傷害はほとんど認められなかった。脳のような脆弱な組織に遺伝子銃で遺伝子を導入するためには、PIGG-3は有用な装置であるといえる。

2 types of の伝子鳳による缝子 introduced method を検多した. The DNA is attached to the surface of the gold particles, the pressure is accelerated by the pressure, and the device is introduced into the cell. Using the machine, the new machine PIGG-3 manufactured by Nippon Medical Machinery Co., Ltd., and the Helios manufactured by Biorad, were used to culture the cells and introduce them into the experiment. The latter is a direct attack on the elephant, a strong attack on the elephant, a strong cell damage, a minimum setting of the central part of the cell, and a disappearance of most of the cells. , former では, ガスのpressure force がハンマー弾, vibration plate をsuke して, gold particles をAccelerating する士组みなため, cell-damaging がvery に小ないことがわかった. Cell membrane penetration ability, the latter's side, and reading electron The microscopic examination is carried out and the gold particles in the cells are checked and confirmed. The new machine is used, the reporter gene is used, the GFP is used in vitro, the cells are imported, and the cells are introduced. The introduction efficiency of グリオーマcells is 100%, and that of Shinto cells is 30%.また、脳のスライスカルチャーにも Import がconfirmation された.さらに, in vivo の実験ではラットを马酔下で开し, dural removal し, GFP を introduction し, 発appear をconfirm した. Import による脳 table no damage はほとんど cognize められなかった.脳のようなFragile tissue and に伝子铳で伝子を Import するためには, PIGG-3 は useful な device であるといえる.

项目成果

佐藤秀光 菅野洋 ら: "脳腫瘍の遺伝子銃による遺伝子導入"Neure-Oncology. 8巻1号. 10-13 (1998)

Hidemitsu Sato、Hiroshi Kanno 等：“通过基因枪导入脑肿瘤”，Neure-Oncology，第 8 卷，第 1. 10-13 期（1998 年）。