量的変化をもつモデルマウスを応用した本態性高血圧症の発症機構解明

利用定量变化的模型小鼠阐明原发性高血压的发病机制

• 批准号: 11877407
• 负责人: 井ノ上 逸朗
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo (2000)Gunma University (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877407/
• 关键词: アンギオテンシノーゲン; 量変化; 本態性高血圧症; 相同組み換え; アンギオテンシノーゲン、; 本態性高血圧症、

我々はアンギオテンシノーゲン遺伝子変異が本態性高血圧と関連することを示した。またアンギオテンシノーゲンの量的変化が血圧と密接に関連することも示している。アンギオテンシノーゲン(AGT)の量的変化が血圧にどのような機序で、かつどの臓器で影響をおよぼすかを動物モデルで解析する。実験に使用するマウスは米国North Carolina大学のSmithies教授のグループにより作成されたものである。マウスAGT遺伝子を破壊したマウス、かつ正常の染色体部位にAGT遺伝子を2個重複して挿入したマウスである。Gene Dose Effectを解析することができるモデルマウスとして確立されている。すなわち、交配により、0コピー、1コピー、2コピー、3コピーそして4コピーとアンギオテンシノーゲン量を変化させることができる。これらのマウスはAGTコピー数以外の遺伝背景がほぼ同一である。各々を交配させることにより、AGT遺伝子を各1,2,3,4個有するマウスを得る。各マウス作成の確認は,PCR法、サザーンブロット法を用いた遺伝子タイピングによって行なった。そして血圧測定、血中アンギオテンシノーゲン、アンギオテンシンペプチド測定など基本データを収集する。血圧測定は侵襲の少ないTail-cuff法でおこなう。マウス血圧測定に関しては、BP-98A,Softronを用い、1匹あたり30分間測定した(安定するまでの時間も含む)。本態性高血圧症の重要な外来因子として塩分摂取はよく知られている。4種の異なる遺伝型をもつマウスに高Na飼料(Na=2%)、普通Na飼料(Na=0.26%)を摂取させ、血圧の変化と血中AGTのレベルを測定する。これらのマウスはもともとAGT発現量に差があるので、塩分摂取によりAGTがさらにどのように変化するか、かつ血圧変化との関連性の解析を試みた。現在のところ、この食餌条件ではマウスの血圧に影響をすことはなかった。おそらくマウスは血圧上昇に関して耐性があるためと示唆される。しかしながら、血圧の変化はなくても近位尿細管での遺伝子発現には変化があることが予測でき、これらがヒト高血圧の候補遺伝子と考えられる。現在DNA arrayシステムにて包括的遺伝子発現変化を測定しているところである。

I 々 は ア ン ギ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン heritage 伝 sub - different が normality high blood 圧 this と masato even す る こ と を shown し た. ま た ア ン ギ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン の - change the amount of blood が 圧 と contact に masato even す る こ と も shown し て い る. ア ン ギ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン (AGT) - the amount of の が blood 圧 に ど の よ う な machine sequence で, か つ ど の viscera で influence を お よ ぼ す か を animal モ デ ル で parsing す る. Be 験 に use す る マ ウ ス は us's university of North Carolina の Smithies professor の グ ル ー プ に よ り made さ れ た も の で あ る. マ ウ ス AGT posthumous son 伝 を broken 壊 し た マ ウ ス, か つ の normal chromosome に AGT heritage 伝 son を 2 repeat し て scions into し た マ ウ ス で あ る. Gene Dose Effectを analysis する るモデ とがで るモデ るモデ ウスと ウスと て て て establishment されて る る. す な わ ち, mating に よ り, 0 コ ピ ー, 1 コ ピ ー, 2 コ ピ ー, 3 コ ピ ー そ し て 4 コ ピ ー と ア ン ギ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン quantity を variations change さ せ る こ と が で き る. The 伝 background がほぼ of the cultural heritage other than the コピ number is the same as that of the である れら れら ウス ウス ウス AGTコピ コピ. Each 々を mated with させる とによ とによ とによ 々を, AGT remains 伝 を with 1,2,3,4 each, and する ウスを ウスを obtained る. Each マ ウ ス の confirm は consummate, PCR method, サ ザ ー ン ブ ロ ッ を ト method with い た heritage 伝 son タ イ ピ ン グ に よ っ て line な っ た. そ し て 圧 determination of blood, blood ア ン ギ オ テ ン シ ノ ー ゲ ン, ア ン ギ オ テ ン シ ン ペ プ チ ド determination な ど basic デ ー タ を 収 set す る. Blood pressure determination invasive lesion な な Tail-cuff method でお なう なう. マ ウ ス blood 圧 に masato し て は, BP - 98 - a, Softron を い, 1 horse あ た り determination between 30 points し た (settle す る ま で の time も む included). In this state of hyperglycemia, the important な foreign factor と て て salt content 摂 is taken from られて よく to know られて る る. Four の different な る heritage type 伝 を も つ マ ウ ス に high (Na = 2%), the common Na Na feed feed (Na = 0.26%) を, take さ せ, blood 圧 の variations change と blood AGT の レ ベ ル を determination す る. こ れ ら の マ ウ ス は も と も と AGT 発 now poor quantity に が あ る の で, salt, take に よ り AGT が さ ら に ど の よ う に variations change す る か, か つ blood 圧 variations change と の masato even sex の parsing を try み た. Now の と こ ろ, こ の continuous conditions で は マ ウ ス の blood 圧 に influence を す こ と は な か っ た. Youdaoplaceholder0, ウス, ウス. Elevated blood pressure に is related to <s:1>. Patience があるためと indicates される. し か し な が ら, blood 圧 の variations change は な く て も proximal tubule urine で の posthumous son 伝 発 now に は variations change が あ る こ と が be で き, こ れ ら が ヒ ト high blood 圧 の alternate heritage 伝 son と exam え ら れ る. The current DNA arrayシステムにて includes the evolution of 伝 offspring を determination of <s:1> て ると ると ろである ろである.

项目成果

Maeda,S: "Functional impact of human collagen α2 (XI) gene polymorphism in pathogenesis of ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine."J.Bone.Miner.Res.. (In press). (2001)

Maeda, S：“人类胶原蛋白 α2 (XI) 基因多态性在脊柱后纵韧带骨化发病机制中的功能影响。”J.Bone.Miner.Res.（出版中）。

Nakajima,T: "Functional analysis of a mutation occurring between the two in-frame AUG codons of human angiotensinogen."J.Biol.Chem.. 274,. 35749-35755 (1999)

Nakajima,T：“人类血管紧张素原两个符合读框的 AUG 密码子之间发生的突变的功能分析。”J.Biol.Chem.. 274，。

Onda,H: "Identification of genes differentially expression canine vasospastic cerebral arteries after subarachnoid hemorrhage."J.Bone Miner.Res.. 19,. 1279-1288 (1999)

Onda，H：“蛛网膜下腔出血后犬血管痉挛性脑动脉差异表达基因的鉴定。”J.Bone Miner.Res.. 19，。

Toshiaki Nakajima: "Functional analysis of a mutation occuring between the two in-frame AUG codons of human angiotensinogen"J Biol Chem. 274. 35749-35755 (1999)

Toshiaki Nakajima：“人类血管紧张素原两个框内 AUG 密码子之间发生的突变的功能分析”J Biol Chem。

Yamada,S: "Cloning of cDNA and the gene encoding human hepatocyte nuclear factor (HNF)-3 beta and mutation screening in Japanese subjects with maturity-onset diabetes of the young."Diabetologia. 43,. 121-124 (2000)

Yamada,S：“克隆 cDNA 和编码人肝细胞核因子 (HNF)-3 β 的基因，并在日本年轻成人糖尿病受试者中进行突变筛查。”Diabetologia。