抗体薄膜の精密製造法の確立

抗体薄膜精密制造方法的建立

• 批准号: 11878173
• 负责人: 安斉 順一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878173/
• 关键词: 抗体薄膜; 精密密製造法; 免疫センサー; 薄膜; 抗体; 精密製造法; 抗体積層膜; 薬物抗体

抗体累積膜を作製するためにアビジンとビオチン標識抗フルオレセインイソチオシアネート(抗FITC)を交互に基板表面に累積固定化する方法の最適化を実施した。これらの溶液(1mg mL^<-1>)に基板を浸して吸着させる方法では、吸着条件をどのように変化させても、作製される抗体累積膜中の抗FITCは表面の4・5層程度しか抗原を吸着しないことが確認された。この点を改善するために、抗原物質が累積膜内部に拡散し易い環境とするべく、不活性タンパク質や合成高分子との混合累積膜を作製して抗原吸着特性を検討した。不活性タンパク質としては血清アルブミン(BSA)、合成高分子としてはポリアリルアミン(PAA)、ポリエチレンイミン(PEI)、ポリビニル硫酸(PVS)、およびポリスチレンスルホン酸(PSS)などを組み合わせて使用した。アビジンは正電荷を有しており表面にPVSやPSSを吸着した。さらにその表面にPAAやPEIを吸着させることにより合成高分子とアビジンや抗体を含む混合累積膜を作製することができた。BSAは抗体と混合して用いた。これらの混合抗体累積膜を用いて抗原結合特性を検討したが、アビジンと抗体だけの累積膜と同様に、抗原を結合するのは累積膜の表面から4・5層の抗体のみであった。このことは混合抗体累積膜としても累積膜内部の抗原の拡散し易さは改善されていないことを示唆する。別の原因として、抗体の変性による抗原結合活性の消失も考えられるが現時点で原因は特定できない。

Optimization of the method of cumulative immobilization on the surface of the substrate by antibody accumulation membrane This solution (1mg mL^<-1>) immersed in the substrate adsorption method, adsorption conditions, change, preparation of antibody accumulation membrane in the anti-FITC surface of the 4.5 layer level, antigen adsorption confirmed. This paper discusses the characteristics of antigen adsorption in the preparation of mixed accumulation membrane of inert substance and synthetic polymer. Inactive substances such as serum albumin (BSA), synthetic polymers (PAA), poly (ethylene oxide)(PEI), poly (ethylene oxide) sulfuric acid (PVS), poly (ethylene oxide) sulfuric acid (PSS), etc. PVS and PSS are adsorbed on the surface of the glass. The surface of PAA and PEI can be adsorbed on the surface of the polymer. BSA antibodies are mixed. The surface of the mixed antibody accumulation membrane is divided into 4 and 5 layers. This is the case with mixed antibody accumulation membranes, which can improve the dispersion of antigens within the membrane. The reason for the disappearance of antigen-binding activity is different.

项目成果

Tomonori Hoshi: "Preparation of spatially ordered multilayer thin films of antibody and their binding properties"Biosensors & Bioelectronics. 15. 623-628 (2000)

Tomonori Hoshi：“抗体的空间有序多层薄膜的制备及其结合特性”生物传感器

斎木 秀和: "抗体累積膜の抗原結合特性の解析"化学センサ. 15. 31-33 (1999)

Hidekazu Saiki：“抗体累积膜的抗原结合特性分析”化学传感器 15. 31-33 (1999)。