drs遺伝子ノックアウトマウス作製による癌化抑制機構の解析

构建drs基因敲除小鼠的抑癌机制分析

• 批准号: 00J01421
• 负责人: 吉岡 敦子 (山下 敦子)
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science (2001-2002)Osaka University (2000)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J01421/
• 关键词: 癌抑制遺伝子; ノックアウトマウス

1.我々が分離したv-srcによるトランスフォーメーションを抑制する活性を持つ新規癌抑制遺伝子drsはC端に膜貫通ドメイン、N端にセレクチンファミリーなどに保存されているsushiモチーフと呼ばれるコンセンサスリピート(CR)を3つ持ち、ヒト癌細胞株においてサイクリンAの発現抑制を介して足場非依存性増殖を抑制する活性を示す。またこの抑制活性にはdrsの膜貫通領域の外側の3つのCRと内側の領域の両方が必要である。さらに大腸癌が良性から悪性化する過程で、また肺や胃の低分化型腺癌やATLのリンパ腫などにおいてもdrsの発現抑制が高頻度で認められることを見い出した。この1年間我々はdrs遺伝子の機能と癌発生における役割を解析し以下の結果を得た。2.drs遺伝子の個体レベル(in vivo)での機能を解析し発癌のメカニズムを明らかにしていくため、以下のようにdrsノックアウト(KO)マウスの作製を行った。(1)複数のESクローンよりキメラマウスを複数ライン得た。(2)生殖系細胞でdrsがKOされているマウス(Null KO)を作製した。(3)ホモdrs KO♀マウスとdrs KO♂マウスの掛け合わせによって得られた胎児より初代培養細胞を調整し、drs KO細胞株の樹立を行った。3.作製したdrs KOマウスを用いて以下のような解析を行っている。(1)マウスの形態や組織の観察を継続的に行い、生後の成長および加齢の過程で正常マウスと比べ異常が見られるかどうか、特に癌化などへの影響をしらべる。(2)活性化ras発現Tgマウスやp53,RB, APCなど他の癌抑制遺伝子のKOマウスとの交配によりダブルKOマウスを作製し、癌化形質の発現におけるdrs遺伝子の役割を明らかにする。現在、作製した活性化ras発現Tgマウスとdrs KOマウスとの掛け合わせを行っている。

1. The activity of inhibiting the development of tumor suppressor gene drs in isolated v-src and N-terminal cell lines was demonstrated by inhibiting the development of tumor suppressor gene drs in C-terminal and N-terminal cell lines by inhibiting the development of tumor suppressor gene A in cancer cell lines. This inhibition activity is necessary for the membrane to penetrate the outer side of the field and the inner side of the field. In addition, the development of benign colorectal cancer, poorly differentiated adenocarcinoma of the lung and stomach, ATL, and DRs was inhibited with high frequency. During the past year, we have analyzed the function of drs gene and the development of cancer. 2. The function of drs gene in vivo is analyzed, and the function of drs gene in vivo is analyzed. (1)The plural number of ES koro kankiri kima rama is obtained from the plural number of messages. (2)Germline cells are controlled by drs KO (Null KO) (3)DrsKO is a new type of cell line. It is a new type of cell line. 3. The following is an example of how to make a decision. (1)The morphology, organization, and growth of the tumor were observed in the normal, abnormal, and especially cancerous processes. (2)Activated ras develop Tg, p53,RB, APC and other cancer suppressor gene KO, DR, and DR gene cleavage in the development of cancerous forms. Now, make active ras to develop Tg, drs, KO, etc.

项目成果

Kawai T. et al.: "Isolation of a novel mouse variant of the drs tumor suppressor gene"Cancer letters. 183(1). 79-86 (2002)

Kawai T.等人：“drs肿瘤抑制基因的新型小鼠变体的分离”癌症字母。

Nakanishi, T., et al.: "FISH Analysis of 142 EGFP Transgene Integration Sites into the Mouse Genome"Genomics. 80(6). 564-574 (2002)

Nakanishi, T. 等人：“小鼠基因组中 142 个 EGFP 转基因整合位点的 FISH 分析”基因组学。

Shimodaira H. et al.: "Interaction of mismatch repair protein PMS2 and the p53-related transcription factor p73 in apoptosis response to cisplatin"Proc Natl Acad Sci USA. 100(5). 2420-2425 (2003)

Shimodaira H. 等人：“错配修复蛋白 PMS2 和 p53 相关转录因子 p73 在顺铂凋亡反应中的相互作用”Proc Natl Acad Sci USA。

Osugi T et al.: "Cardiac-specific activation of signal transducer and activator of transcription 3 promotes vascular formation in the heart"J Biol Chem. 277・8. 6676-6681 (2002)

Osugi T 等：“信号转导子和转录激活子 3 的心脏特异性激活促进心脏中的血管形成”J Biol Chem 277・8（2002）。