ナトリウムイオン駆動型回転モーター特異的蛋白質MotXとMotYの機能解析

钠离子驱动的旋转电机特异性蛋白 MotX 和 MotY 的功能分析

基本信息

  • 批准号:
    12878122
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

昨年度は、海洋性ビブリオ菌においてmotXのクローン化を行い、motXとmotY遺伝子から発現させた蛋白質が、相互作用することを示した。また、モーター蛋白質としてMotXの方が機能に必須である可能性も示唆した。今年度は、まず、この結果をまとめるために、データを取り直し、論文として発表した。続いて、MotXが大腸菌に及ぼす影響について、大腸菌でV. alginolyticusのMotXを発現させて調査したところ、その発現量に伴って大腸菌の生育が抑制されることが分かった。また、生育抑制のみならず、生菌数の減少が認められた為、Na^+チャネル阻害剤であるアミロライドによって、この大腸菌の致死性が緩和されるかどうかを検討した。アミロライド存在下では、大腸菌の生育自身が大幅に抑制されMotXの発現量も低下した。このため、アミロライドの効果を特定することは困難であり、MotXがNa^+チャネルとして働くという他の研究グループの結果を考え直す必要性を示唆した。続いて、PomAの最もN末端側の推定膜貫通領域を含む部分と、MotXまたはMotYにおけるN末端側推定膜貫通領域を除くC末領域をつなげて、AXキメラ、AYキメラと名付けた融合タンパク質を作製した。作製したAXキメラ、AYキメラの機能は、野生型MotX、MotYと比べると無視できる程度で効果的とはいえず、AXキメラの発現は、大腸菌の生育には影響なかった。加えて、AXキメラ、AYキメラともに膜画分に存在することを明らかにした。また、MotX、AXキメラともに6M尿素によって可溶化できることを確認した。この結果から、AXキメラはMotXの性質をある程度保有していると推測された。一方、MotXは内膜でも外膜でもないところに存在しているようであったのに対して、AXキメラは完全に内膜に存在しているようであった。これらを総合して、AXキメラ、AYキメラは、機能に直接関係し、その性質を反映する部分を持つものの、正しく局在するために必要な部分を持っておらず、本来局在すべき場所に局在できないために機能を発揮できなくなったと推論した。
In the past year, the development of protein and interaction between motX and motY genes has been demonstrated. MotX is a protein that must be expressed in terms of its function. This year, the results of the study are as follows: E. coli and E. coli. Alginolyticus and MotX were investigated and their production was accompanied by growth inhibition of Escherichia coli. The results showed that the growth inhibition rate was significantly lower than that of the control group, and the mortality of Escherichia coli was significantly lower than that of the control group. In the presence of E. coli, the reproduction of E. coli itself is greatly inhibited, and the production of E. coli is reduced. The difficulty and necessity of finding out the results of this study are discussed. The putative membrane penetration area on the N-terminal side of PomA includes a part of the membrane penetration area on the N-terminal side, and the putative membrane penetration area on the N-terminal side includes a part of the membrane penetration area on the N-terminal side. The function of controlling AX and AY is opposite to that of wild type MotX and MotY. The degree of disregard is opposite to that of AX and AY. The reproduction of Escherichia coli is opposite to that of wild type MotX and MotY. Add, AX, AY, AZ, AZ, MotX, AX, 6M, 6M The results of this study are as follows: A square, MotX, inner membrane, outer membrane, inner membrane, The function is directly related to the function, and the property is reflected in the part of the function. The necessary part of the function is maintained in the original place. The function is developed in the original place.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Okabe, M., Yakushi, T., Asai, Y., Homma, M.: "Cloning and characterization of motX, a Vibrio alginolyticus sodium-driven flagellar motor gene"J. Biochem.. 130(6). 879-884 (2001)
Okabe, M.、Yakushi, T.、Asai, Y.、Homma, M.:“溶藻弧菌钠驱动鞭​​毛运动基因 motX 的克隆和表征”J.
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yorimitsu,T.,and M.Homma.: "Na^+-driven flagellar motor of Vibrio."Biochem.Biophys.Acta-Bioenergetics. (in press). (2001)
Yorimitsu,T. 和 M.Homma.:“Na^ 驱动的弧菌鞭毛马达。”Biochem.Biophys.Acta-Bioenergetics。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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