カンピロバクター腸炎後ギラン・バレー症候群のモデル作成と、新たな治療法の開発

弯曲菌肠炎后格林-巴利综合征模型的创建和新疗法的开发

• 批准号: 00J04734
• 负责人: 古賀 道明
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Dokkyo Medical University (2002)Yamaguchi University (2000-2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J04734/
• 关键词: ギラン・バレー症候群; Campylobacter jejuni; 抗ガングリオシド抗体; 疾患モデル; リポ多糖; 分子相同性

Campylobacter jejuni腸炎後ギラン・バレー症候群(GBS)の発症機序として、分子相同性仮説が提唱されている。つまり、ヒト末梢神経に豊富に存在するGM1様構造をC. jejuniのリポ多糖(LPS)が有することから、C. jejuni腸炎を契機としてIgG抗GM1抗体が産生され、末梢神経障害を来たすと想定されている。この分子相同性の存在がGBSの発症に関与することを証明するために、実験動物にC. jejuni LPSを感作することでGBS疾患モデルの作成が過去に試みられたが、血中に抗GM1抗体が誘導されたのみで神経障害はみられなかった。近年我々は、GM1ガングリオシド感作によりIgG抗GM1抗体上昇を伴ったGBS疾患モデルの樹立に成功した。本研究ではこのプロトコールに倣い、患者から実際に分離された菌株から精製したGM1様LPSを感作することによりGBS疾患モデルの樹立を試みた。GBS患者から分離されたC. jejuni (CF 90-26)からLPSを精製した。Japanese white rabbit23羽にkeyhole limpet hemocyanin 1mg、Freund完全アジュバントとC. jejuni LPSを2.5mg(n=15)もしくは10mg(n=8)を3週に1回皮下に感作を繰り返した。IgM抗GM1抗体産生が誘導されたばかりでなく、IgGへクラススイッチした。LPSを2.5mgずつ感作した群では3羽(20%)に、10mgずつ感作した群では全例に運動麻痺が生じた。脊髄前根の軸索周囲にIgGが沈着していた。坐骨神経にワーラー様の変性像がみられた。脱髄像やリンパ球の浸潤はみられなかった。これに対して、アジュバント対照群10羽では、抗GM1抗体も誘導されず、1羽も発症しなかった。病理組織学的にも明らかな変化はみられなかった。E. coli K12、Salmonella minnesota R595のLPSを感作したウサギでも抗GM1抗体は誘導されず、運動麻痺を呈さず、病理組織学的にも異常はみられなかった。C. jejuni LPSを感作して発症したウサギの末梢神経病変は脱髄ではなく軸索変性を主体とし、C. jejuni腸炎後GBS剖検例と同様の所見を呈した。発症率は感作LPSの量に依存した。本疾患モデルは、分子相同性仮説を支持する直接的な証拠と考えられる。

已经提出了分子同源性假说是在弯曲杆菌空肠肠炎之后发展Guillain-Barré综合征（GB）的一种机制。换句话说，空肠梭菌的脂多糖（LPS）具有类似GM1的结构，在人外周神经中很丰富，并且假定J. jejuni肠炎是产生IgG抗GM1抗体的触发，导致外周神经病。为了证明该分子同源性的存在与GB的发展有关，以前已经尝试通过将Jejuni LPS敏化为实验动物来创建GBS疾病模型，但是没有观察到仅观察到抗GM1抗体的神经病。近年来，我们成功建立了一个GBS疾病模型，其中GM1神经节苷脂的敏化涉及IgG抗GM1抗体的升高。在这项研究中，遵循该方案，我们试图通过从实际上从患者中分离出的菌株中纯化的GM1样LP来建立GBS疾病模型。 LPS从从GBS患者中分离出的Jejuni（CF 90-26）中纯化。用1 mg的钥匙孔lim胶血蛋白，弗洛德的完整辅助剂和圆锥杆菌LPS皮下敏感，以2.5 mg（n = 15）或10毫克（n = 8）每三周一次地皮下敏感。 IgM抗GM1抗体的产生不仅诱导了IgM，而且还将其切换到IgG。运动瘫痪发生在三只鸟类（20％）中，该组由2.5 mg LPS敏感，在该组中的所有情况下，其敏感为10 mg。 IgG沉积在前脊髓根的轴突周围。在坐骨神经中看到了瓦勒相似性的退化图像。未观察到脱髓鞘或淋巴细胞浸润。相比之下，在10个辅助对照组中未诱导抗GM1抗体，并且疾病均未发生。也没有观察到明显的组织病理学变化。甚至兔子对大肠杆菌K12的LPS和明尼苏达州沙门氏菌R595的LPS也没有诱导抗GM1抗体，没有表现出运动麻痹，也没有观察到组织病理学异常。兔子lps敏化后出现的兔子周围神经病变主要是由于轴突变性而不是脱髓鞘，并且显示出与空肠梭状芽孢杆菌肠炎的发现相似的发现。发病率取决于敏化LP的量。该疾病模型被认为是支持分子同源性假设的直接证据。

项目成果

Shimamura H, Miura H, Iwaki Y, Kubodera T, Matsuoka T, Yuki N, Koga M.: "Clinical, electrophysiological, and serological overlap between Miller Fisher syndrome an acute sensory ataxic neuropathy"Acta Neurol Scand. 105・5. 411-413 (2002)

Shimamura H、Miura H、Iwaki Y、Kubodera T、Matsuoka T、Yuki N、Koga M.：“米勒·费舍尔综合征与急性感觉共济失调神经病之间的临床、电生理学和血清学重叠”Acta Neurol Scand 105・5。 413（2002）

Yuki N, Susuki K, Koga M, Nishimoto Y, Kamijo M.: "Myelin-derived glycolipids and animal models of Guillain-Barre syndrome. Reply"Ann Neurol. 51・4. 532-533 (2002)

Yuki N、Susuki K、Koga M、Nishimoto Y、Kamijo M.：“髓磷脂来源的糖脂和格林-巴利综合征的动物模型。回复”Ann Neurol 51・4（2002）。

Koga M, Yoshino H, Morimatsu M, Yuki N.: "Anti-GT1a IgG in Guillain-Barre syndrome"J Neurol Neurosurg Psychiatry. 72・6. 767-771 (2002)

Koga M、Yoshino H、Morimatsu M、Yuki N.：“格林巴利综合征中的抗 GT1a IgG”J Neurol Neurosurg Psychiatry 72・6（2002）。

Sakakibara Y, Mori M, Kuwabara S, Katayama K, Hattori T, Koga M, Yuki N: "Unilateral cranial and phrenic nerve involvement in axonal Guillain-Barre syndrome"Muscle Nerve. 25・2. 297-299 (2002)

Sakakibara Y、Mori M、Kuwabara S、Katayama K、Hattori T、Koga M、Yuki N：“轴突格林-巴利综合征的单侧颅神经和膈神经受累”肌肉神经25・2。

Okuda B, Koga M, Katsuta T, Okamoto K, Yuki N.: "Fulminant Guillain-Barre syndrome after Campylobacter jejuni enteritis and monospecific anti-GT1a IgG antibody"Intern Med. 41・10. 889-891 (2002)

Okuda B、Koga M、Katsuta T、Okamoto K、Yuki N.：“空肠弯曲杆菌肠炎和单特异性抗 GT1a IgG 抗体后的暴发性格林巴利综合征” Intern Med 41・10。