海産食藻動物消化管内微生物ワールドに関する分子生態学的研究

海洋食藻胃肠微生物世界的分子生态研究

• 批准号: 00J07103
• 负责人: 田中 礼士
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J07103/
• 关键词: Abalone; FISH; 群集構造解析; 消化管; バクテリア; 食藻動物; 生態

1.コンブを摂餌させた個体における消化管内微生物叢の解析平成13年度までに絶食期および人工配合飼料を摂餌したエゾアワビ消化管内細菌群の構造解析を行い、Alpha-,GammaproteobacteriaおよびMycoplasmaが存在する可能性を見出した。本年度はコンブを投餌され、天然環境に近い摂餌条件の個体の消化管内細菌群集構造を16S rDNAクローンライブラリー法により解析した。その結果、得られた17クローンのうち10クローンがMycoplasmaであり、残りはAlpha-,またはEpsilonproteobacteriaに属するものであった。2.FISHを用いた消化管内細菌群の定量的検討クローンライブラリー法で確認された細菌群を中心に、グループ特異的プローブを用いたFISH法によりアワビ消化管内細菌群の構成を定量的に検討した。プローブには古細菌、真正細菌、Alpha-,Gammaproteobacteria, VibrioおよびMycoplasmaの16S rRNAに特異的なオリゴヌクレオチドをローダミン標識したものを用いた。各プローブとの反応後、蛍光顕微鏡下で総菌数およびプローブ反応陽性細胞数を計数したところ、総菌数に対する各細菌群の割合は、真性細菌が78%、Alphaproteobacteriaが2%、Gammaproteobacteriaが54%であった。またVibrio属細菌は総菌数の40%を占めていたことから、アワビ消化管内の優占細菌群の一つであることが示された。さらに、Mycoplasmaは消化管ホモジナイズ試料の遠心上清ではなく組織残査画分から多く検出されたが、宿主細胞中で細菌細胞塊を形成していたため計数は困難であった。また、古細菌群は検出限界以下であった。

1. Analysis of the microorganisms in the digestive tract of individual コンブを摂bait させたにおける during the hunger strike period of 2013 Structural analysis of the bacterial flora, Alpha-, Gammaproteobacteria, Mycoplasma, the possibility of its existence, and the possibility of its existence. This year, the bacterial community structure in the digestive tract of the individual in the natural environment and the bait conditions was analyzed using the 16S rDNA analysis method.そのRESULT、getられた17クローンのうち10クローンがMycoplasmaであり、 residual りはAlpha-, Epsilonproteobacteria genus するものであった. 2.FISH is used to determine the center of the bacterial population in the digestive tract using the 検クローンライブラリー method to quantify the bacterial population in the digestive tract. , グループspecific プローブをUse the いたFISH method to quantify the composition of the bacterial population in the digestive tract.プローブにはArchaea, true bacteria, Alpha-, Gammaproteobacteria, VibrioおよびMycoplasmaの16S rRNA is a specific nuclease that is used to identify rRNA. After each reaction, the number of bacteria in the reaction under a microscope was determined The number of positive cells is counted, the number of bacteria is counted, and the number of bacteria is divided into groups. True bacteria が78%, Alphaproteobacteria が2%, Gammaproteobacteria が54% であった. Bacteria belonging to the genus Vibrio account for 40% of the bacterial count in the digestive tract, and the bacterial population in the digestive tract is dominant.さらに、MycoplasmaはDigestive tube ホモジナイズsample のtelecentric supernatant ではなくtissue residual examination and analysis It is difficult to count the number of bacterial cells in the host cell.また, Archaea group は検 is below the limit であった.

项目成果

Tanaka: "Distribution of Vibrio halioticoli around an abalone-farming center in Japan"Microbes and environments. 17-1. 6-9 (2002)

田中：“日本鲍鱼养殖中心周围的鲍鱼弧菌分布”微生物和环境。