Biochemie und Molekularbiologie von Betanidin-Glucosyltransferasen

甜菜碱葡萄糖基转移酶的生物化学和分子生物学

• 批准号: 5302866
• 负责人: Privatdozent Dr. Thomas Vogt
• 金额: --
• 依托单位: Leibniz-Institut für Pflanzenbiochemie (IPB)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1996-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5302866?language=en
• 关键词: Biochemie; und; Molekularbiologie; von; Betanidin

Die Klonierung und Expression der Betanidin-5 und 6-O-Glucosyltransferasen (5-GT und 6-GT) von Dorotheanthus bellidiformis ermöglicht detaillierte Untersuchungen der Substratspezifität dieser Enzyme in Realtion zu ihrer Aminosäuresequenz sowie der Proteinstruktur. Durch Mutagense konservierter Aminosäuren, sowie Modifizierung möglicher, für die Substraterkennung wichtiger N-terminaler Bereiche, sollen Erkenntnisse über die Substratspezifität, resp. Regioselektivität der individuellen Betanidin-Glucosyltransferasen im Hinblick auf ähnliche, möglicherweise phylogenetisch verwandte Flavonoid-Glucosyltransferasen erarbeitet werden. Die Überexpression der 5-GT in Tabak, der eine Fusion mit dem "green fluorescent protein" (GFP) die umstrittene subzelluläre Lokalisation der Glucosyltransferasen klären. Die Licht-induzierte und zellspezifischen Flavomoid- und Betacyan-Akkumulation kann in Blasenzellen von Mesembryanthemum crystallinum untersucht werden. Dabei stehen, neben möglichen induzierbaren Enzymen der Betacyan- und Flavonoidbiosynthese, die Identifizierung Licht-induzierter Glucosyltransferasen und deren Substratspezifität für Flavomoide und Betacyane im Zentrum der Untersuchungen.

本文详细研究了刺叶菊Betanidin-5和6-O-Glucosyltransferasen（5-GT和6-GT）的克隆和表达与底物特异性酶在蛋白质结构中的关系。通过对氨基化合物进行诱变处理，对N-末端化合物进行改良，从而解决底物特异性问题。Hinblick auf ähnliche中Betanidin-Glucosyltransferasen个体的区域选择性，möglicherweise genetisch verwandte Flavonoid-Glucosyltransferasen erarbeitet韦尔登。在Tabak中5-GT的超表达，与“绿色荧光蛋白”（GFP）的融合，使葡萄糖基转移酶的亚细胞定位。光诱导和类黄酮和β-氨基糖苷的诱导可以在中胚细胞中进行韦尔登。本文首先介绍了β-环糊精和类黄酮生物合成酶的合成方法，并在研究中心对β-环糊精和类黄酮生物合成酶进行了光诱导葡萄糖基转移酶和底物的鉴定。