新規損傷神経関連遺伝子による生存・再生のメカニズム

新型受损神经相关基因的生存和再生机制

• 批准号: 12031201
• 负责人: 瀬尾 寿美子
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12031201/
• 关键词: 神経損傷; DINE; メタロプロテアーゼ; 神経細胞死; 神経細胞特異的プロモーター; 遺伝子導入

神経損傷応答遺伝子として得られたメタロプロテアーゼDINE(Damage induced neuronal endopeptidase)の解析を行った。昨年度までに我々はDINEが中枢・末梢神経系の軸索障害に対して鋭敏に発現応答すること、細胞死防御活性を持つことを明らかにしている。今年度はこの点に着目し、(1)神経細胞死防御のための細胞内シグナリング、(2)DINE遺伝子の5'上流領域の解析を行った。(1)DINEを介した細胞内シグナリング神経細胞でのDINE過剰発現を目的として、DINEを組み込んだアデノウイルスを作製した。神経細胞により近い分化PC12細胞にこれを過剰発現させたところ、NGF除去後のアポトーシスが有意に抑制された。これはDINEによりプロセッシングを受けた未同定の基質が、G蛋白共役型受容体を介して生存シグナルを活性化させるためであることが明らかになった。しかし、DINEの基質は未だ不明であること、DINE以外の生存シグナル活性化分子は極めて多く報告されていることから、DINE特有の機能を明らかにすることが今後の課題として残された。(2)DINE遺伝子5'上流領域の解析様々な長さのDINE遺伝子5'上流領域をレポーター遺伝子に結合させたコンストラクトを作製し、神経細胞、非神経細胞におけるプロモーター解析を行った。この結果、極めて特異的に神経細胞にプロモーター活性を示すことが明らかになった。同様のアデノウイルスを作製し、初代培養系やラット大脳皮質への遺伝子導入実験を行った結果、神経細胞特異的発現が証明された。さらに、サイトカイン刺激によりDINEプロモーター活性が上昇することから、これが神経障害後の鋭敏な発現応答の一因と考えられた。以上のことは、グリア細胞などが混在する神経系において、損傷を受けた神経細胞に標的を絞った遺伝子導入が可能となることを示唆するものである。

Analysis of DINE(Damage induced neuronal endopeptidase) In the past year, we have been able to detect the presence of DINE in the central and peripheral nervous system, and to detect the presence of DINE in the central and peripheral nervous system. This year's focus is on: (1) intracellular protection against neuronal death; and (2) analysis of the 5'upstream domain of DINE genes. (1)DINE expression in cells is controlled by DINE expression in cells. Neuronal differentiation of PC12 cells was inhibited by NGF. This is the first time I've ever seen a G-protein receptor activated. DINE's matrix is not clear, DINE's survival is not clear, DINE's unique function is clear, DINE's survival is not clear. (2) Analysis of DINE gene 5 'upstream domain and analysis of DINE gene 5' upstream domain in combination with control, neuronal and non-neuronal analysis. The result is a very specific neurocellular activity. The results of gene introduction in primary culture system and neurocyte-specific development were demonstrated. A study of the causes of acute response after neurotoxicity The above results show that the gene transfer of the target gene in the brain system is possible due to the disorder of the brain cells.

项目成果

Nakagomi S,: "Endothelin-converting enzymes and endothelin receptor B messenger RNAs are expressed in different neural cell species and these messenger RNAs are coordinately induced."Neuroscience. 441-9 (2000)

Nakagomi S，：“内皮素转换酶和内皮素受体 B 信使 RNA 在不同的神经细胞种类中表达，并且这些信使 RNA 被协调诱导。”神经科学。

Kiryu-Seo S,: "Damage-induced neuronal endopeptidase (DINE) is a unique metallopeptidase expressed in response to neuronal damage and activates superoxidescavengers."Proc Natl Acad Sci U S A.. 4345-50. (2000)

Kiryu-Seo S，：“损伤诱导的神经元内肽酶 (DINE) 是一种独特的金属肽酶，在神经元损伤反应中表达并激活超氧化物清除剂。”Proc Natl Acad Sci U S A.. 4345-50。