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尿中HGF測定による泌尿器系腫瘍の新しい診断法の確立

测定尿HGF建立泌尿系统肿瘤诊断新方法

基本信息

批准号：
12217122
负责人：
大工原恭
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究はヒトHGF ELISA系を高感度化して、尿中のHGF濃度を泌尿器系腫瘍の早期発見、予後診断に利用することを目的として行ったものであり、以下の結果を得た。(1)ウサギ抗HGF抗体(IgG)をFab'化してβ-ガラクトシダーゼと結合させたものを2次抗体とし、1次抗体にはマウス抗HGFモノクローナル抗体を用いてサンドイッチELISA系(測定感度、1pg/ml)を調製した。これは、現在市販され臨床応用されているHGF ELISAの測定感度(0.2ng/ml)の200倍である。(2)健常者尿試料を用い、このELISAの回収試験、希釈試験、再現試験を行ったところ、いずれも満足すべき結果が得られ、尿試料を濃縮することなくHGFが測定可能となった。(3)上記のELISAで健常者尿試料(n=19)中のHGF濃度を測定すると、4.1-66.3pg/mlであり、これをそれぞれのクレアチニン濃度で補正すると、19.3±7.1(SD)pg/mgクレアチニンであった。(4)この濃度は、健常者血漿のHGF濃度(約200pg/ml)の1/50-1/3である。通常、尿中の血漿タンパク(例えばアルブミンやIgG)濃度は、血漿中の濃度の約1/1,000-1/5,000とされていることから考えると、我々が今回得た結果は、HGFが腎臓あるいはそれ以降の臓器で合成され、尿中に出現していることを強く示唆するものである。上記の結果を踏まえて、種々の泌尿器系腫瘍及び炎症患者尿試料の測定を試み、診断薬としての可能性を検討したが、健常者尿中HGF濃度が予想外に高かったことから、膀胱がんや前立腺がんなどでは、平均値は健常者のそれに比べて有意に高いものの、クレアチニン値で補正しても有用なcut off値を見出すことは出来なかった。現在は、同一患者の尿中HGF濃度を病状と比較しつつ経時的に測定し、経過観察、予後診断に利用できないか検討中である。

The results of this study are as follows: HGF ELISA system is highly sensitive, HGF concentration in urine is early detection of urinary tract tumors, and the use of HGF in the diagnosis of urinary tract tumors is very important. (1)Anti-HGF antibodies (IgG) were synthesized in the presence of a secondary antibody, a primary antibody, and an ELISA system (assay sensitivity, 1pg/ml). The sensitivity of HGF ELISA (0.2ng/ml) was 200 fold higher than that in clinical use. (2)Healthy urine samples were used, and the ELISA assay was performed in the presence of HGF. (3)HGF concentrations in urine samples from healthy individuals (n=19) determined by ELISA above ranged from 4.1 pg/ml to 66.3 pg/ml, corrected to 19.3±7.1(SD)pg/mg. (4)The concentration of HGF in plasma of healthy subjects (about 200pg/ml) is 1/50-1/3 of that of healthy subjects. Usually, the concentration of HGF in plasma (e.g., IgG) in urine is about 1/1,000-1/5,000 of that in plasma. The results of this study were as follows: urine samples from patients with urinary tract edema and inflammation were tested, and the possibility of diagnosis was discussed. Urine HGF concentration in healthy patients was unexpectedly higher than that in healthy patients. Urine HGF concentration in bladder and prostate was significantly higher than that in healthy patients. Urine HGF concentration in healthy patients was significantly higher than that in healthy patients. Now, HGF concentration in urine of the same patient can be compared with other symptoms.