尿中HGF測定による泌尿器系腫瘍の新しい診断法の確立

本研究はヒトHGF ELISA系を高感度化して、尿中のHGF濃度を泌尿器系腫瘍の早期発見、予後診断に利用することを目的として行ったものであり、以下の結果を得た。(1)ウサギ抗HGF抗体(IgG)をFab'化してβ-ガラクトシダーゼと結合させたものを2次抗体とし、1次抗体にはマウス抗HGFモノクローナル抗体を用いてサンドイッチELISA系(測定感度、1pg/ml)を調製した。これは、現在市販され臨床応用されているHGF ELISAの測定感度(0.2ng/ml)の200倍である。(2)健常者尿試料を用い、このELISAの回収試験、希釈試験、再現試験を行ったところ、いずれも満足すべき結果が得られ、尿試料を濃縮することなくHGFが測定可能となった。(3)上記のELISAで健常者尿試料(n=19)中のHGF濃度を測定すると、4.1-66.3pg/mlであり、これをそれぞれのクレアチニン濃度で補正すると、19.3±7.1(SD)pg/mgクレアチニンであった。(4)この濃度は、健常者血漿のHGF濃度(約200pg/ml)の1/50-1/3である。通常、尿中の血漿タンパク(例えばアルブミンやIgG)濃度は、血漿中の濃度の約1/1,000-1/5,000とされていることから考えると、我々が今回得た結果は、HGFが腎臓あるいはそれ以降の臓器で合成され、尿中に出現していることを強く示唆するものである。上記の結果を踏まえて、種々の泌尿器系腫瘍及び炎症患者尿試料の測定を試み、診断薬としての可能性を検討したが、健常者尿中HGF濃度が予想外に高かったことから、膀胱がんや前立腺がんなどでは、平均値は健常者のそれに比べて有意に高いものの、クレアチニン値で補正しても有用なcut off値を見出すことは出来なかった。現在は、同一患者の尿中HGF濃度を病状と比較しつつ経時的に測定し、経過観察、予後診断に利用できないか検討中である。

本研究はヒトHGF ELISA系を高感度化して、尿中のHGF濃度を泌尿器系腫瘍の早期発見、予後診断に利用することを目的として行ったものであり、以下の結果を得た。(1)ウサギ抗HGF抗体(IgG)をFab'化してβ-ガラクトシダーゼと結合させたものを2次抗体とし、1次抗体にはマウス抗HGFモノクローナル抗体を用いてサンドイッチELISA系(測定感度、1pg/ml)を調製した。これは、現在市販され臨床応用されているHGF ELISAの測定感度(0.2ng/ml)の200倍である。(2)健常者尿試料を用い、このELISAの回収試験、希釈試験、再現試験を行ったところ、いずれも満足すべき結果が得られ、尿試料を濃縮することなくHGFが測定可能となった。(3)上記のELISAで健常者尿試料(n=19)中のHGF濃度を測定すると、4.1-66.3pg/mlであり、これをそれぞれのクレアチニン濃度で補正すると、19.3±7.1(SD)pg/mgクレアチニンであった。(4)この濃度は、健常者血漿のHGF濃度(約200pg/ml)の1/50-1/3である。通常、尿中の血漿タンパク(例えばアルブミンやIgG)濃度は、血漿中の濃度の約1/1,000-1/5,000とされていることから考えると、我々が今回得た結果は、HGFが腎臓あるいはそれ以降の臓器で合成され、尿中に出現していることを強く示唆するものである。上記の結果を踏まえて、種々の泌尿器系腫瘍及び炎症患者尿試料の測定を試み、診断薬としての可能性を検討したが、健常者尿中HGF濃度が予想外に高かったことから、膀胱がんや前立腺がんなどでは、平均値は健常者のそれに比べて有意に高いものの、クレアチニン値で補正しても有用なcut off値を見出すことは出来なかった。現在は、同一患者の尿中HGF濃度を病状と比較しつつ経時的に測定し、経過観察、予後診断に利用できないか検討中である。