移植後冠動脈硬化に対する抗炎症性サイトカイン療法の試み

抗炎细胞因子治疗移植后冠状动脉粥样硬化的试验

• 批准号: 12877117
• 负责人: 今泉 勉
• 金额: --
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877117/
• 关键词: 移植後冠動脈硬化; 心臓移植; 遺伝子治療; TNF-α; リモデリング

(1)移植心冠動脈硬化モデルの作成F344ラットの心臓をLewisラットのアログラフトとして腹部に移植し、免疫抑制剤FK506を連日投与し急性拒絶を抑制し、移植心硬化モデルを作成した。現在、手術死亡率が10%以下、術後2カ月生存率が20%以下であり、安定したモデルの作成に成功した。(2)移植心冠動脈硬化モデルの評価・組織学的検討:コンピュータ画像解析により冠動脈の内腔面積・内膜面積・全血管面積・外膜面積・内膜/中膜面積比・血管周囲線解析し、血管リモデリングを定量評価した。移植心において、中小冠血管を中心にびまん性に全周性内膜肥厚が認められた。・免疫組織学的検討:今後、特異的マーカー抗体を用いて浸潤炎症細胞を同定・定量評価。接着因子発現を半定量評価。定量的RT-PCR法:今後、炎症性サイトカイン(TNF-α,MCP-1)発現を検討。(3)TNF-R:Fc遺伝子作成とTNF-α機能抑制作用の検討ヒトTNF-R細胞外ドメインとFc鎖のキメラ遺伝子(TNFR:Fc)組み換えプラスミドpVR1255TNFR・FcをPCR法を用いて作成した。in産生系を用いてTNF:Fcタンパクを精製した。リコンピナントTNF-αによる培養線維芽細胞細胞増殖を精製TNF:Fcタンパクがほぼ抑制することを確認した。(4)TNFR:Fc遺伝子導入と移植冠動脈硬化に及ぼす影響の検討TNFR:Fc遺伝子導入:HVJ=リポゾーム法を用いたコントロール遺伝子(LacZ遺伝子)の遺伝子導入には成功した。今後、TNFR:Fc遺レシピエントラットの下肢骨格筋に導入する予定。(1)TNFR:Fc遺伝子導入が、生存率・アログラフト生着率に及ぼす影響、(2)TNFF伝子導入が、血管リモデリング・炎症細胞浸潤・接着因子発現・炎症性サイトカイン発現に及ぼす影響を評価する。

(1)F344, Lewis, abdominal transplant, immunosuppressant FK506, daily administration, acute rejection, transplant sclerosis At present, the operative mortality rate is less than 10%, and the postoperative 2-month survival rate is less than 20%. (2)Histological evaluation of coronary artery sclerosis: quantitative evaluation of coronary artery lumen area, intima area, total vessel area, intima/media area ratio, perivascular line analysis and vascular fibrosis Transplanted heart, small and medium-sized coronary artery center, full circumferential intimal hypertrophy Immunohistologic evaluation: future, specific antibodies to infiltrate inflammatory cells and quantitative evaluation. Then the factor appearance was semi-quantitatively evaluated. Quantitative RT-PCR: Detection of inflammatory cytokines (TNF-α,MCP-1) in the future. (3)TNF-R:Fc gene production and TNF-α function inhibition of the study of TNF-R extracellular matrix and Fc lock gene (TNFR:Fc) group to change the matrix and pVR1255TNFR·Fc PCR method to produce. In the production system, TNF:Fc is refined. TNF-α is the most important factor in cell proliferation. (4)TNFR:Fc Gene Introduction and Transplant Coronary Artery Hardness and Impact Analysis TNFR:Fc Gene Introduction:HVJ= Free Vector Method In the future, TNFR:Fc will be introduced into the lower limb bones and tendons. (1)TNFR:Fc gene introduction, survival rate, inflammatory cell survival rate, and impact;(2)TNFF gene introduction, vascular metastasis, inflammatory cell infiltration, adhesion factor development, inflammatory cell development, and impact.