NF-kB活性化経路の特異的阻害による敗血症性ショックの遺伝子治療

通过特异性抑制 NF-kB 激活途径进行感染性休克的基因治疗

• 批准号: 12877240
• 负责人: 平田 結喜緒
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877240/
• 关键词: 敗血症性ショック; NF-kB; 誘導型NO合成酵素; NO; IkB; サイトカイン

NF-kB活性化を特異的に阻害する手段としてiNOS遺伝子の5'側非翻訳領域に存在するkB結合部位(-170〜-97)に対応した合成オリゴマーを"decoy"として作製してリポフェクチンで血管平滑筋細胞へ導入した後、サイトカイン(IL-1、TNF-α)によるiNOS誘導を行った結果、著明にiNOSの発現が抑制された。しかし対照となるスクランブル合成オリゴマーも濃度によっては"decoy"オリゴマーと同様にサイトカインによるiNOS誘導が抑制された。したがって"decoy"オリゴマーの導入に際しては至適な濃度の選択が必要となり、生体への応用には難点といえる。一方IkBの阻害因子であるIkBα遺伝子を効率の良いトランスフェリンレセプターを介した方法で導入するとサイトカインによるiNOS発現は完全に抑制された。一方dominant-negative IkBα遺伝子の導入ではiNOS発現阻害効果はみられなかった。本研究からiNOSの選択的阻害の遺伝子治療としてはNF-kBに対する"decoy"オリゴマーの導入よりもNF-kBの内因性阻害因子であるIkBαの導入の方が優れていることが判明した。現在敗血症動物モデルを用いてIkBα遺伝子の効率のよい導入を試みている。

NF-kB activation is specifically inhibited by the presence of kB-binding sites (-170 ~-97) in the 5'non-inverting domain of the iNOS gene, which results in the inhibition of iNOS production after the introduction of the iNOS gene (IL-1, TNF-α) into vascular smooth muscle cells. INOS induction is inhibited by the presence of a "decoy" molecule in the cell. "Decoy" is the most important factor in the selection of biological agents. The inhibition factor of IkBα gene is completely suppressed. A dominant-negative IkBα gene is introduced into the cell to inhibit iNOS production. This study aims to identify the optimal pathway for the introduction of IkBα into the NF-kB system, which is an intrinsic inhibitor of iNOS. Now, the efficiency of IkBα gene is introduced into the experimental animal model.

项目成果

Shichir M.,Hirata Y. et.al.: "Endothelin inhibits apoptosis of vascular smooth muscle cells induced by nitric oxide and seium deprivation via Mupkinose Pathway"Arteriosder,Thromb,Vase,Biol.. 20. 989-997 (2000)

Shichir M.、Hirata Y. 等人：“内皮素通过 Mupkinose 途径抑制一氧化氮和缺硒诱导的血管平滑肌细胞凋亡”Arteriosder、Thromb、Vase、Biol.. 20. 989-997 (2000)

Doi M.,Hirata Y. et.al.: "Oytokine - activated p42 / p44 Map kinase is imdved in inducible mitricoxide synthase gene expression independent from NF - kb activation in vascular smooth muscle cells."Hyperten,Res.. 23. 659-667 (2000)

Doi M.，Hirata Y. 等人：“Oytokine 激活的 p42 / p44 Map 激酶在诱导型三氧化二氮合酶基因表达中发挥作用，与血管平滑肌细胞中 NF - kb 的激活无关。”Hyperten，Res.. 23. 659

Iwasaki H.,Hirata Y. et.al.: "Mechanical stretch stimulates groath of vascular smooth musclecells via epidermal groath factor receptor."Am.J.Physicl.(Heart Ctrc.Physicl.). 278. H521-h529 (2000)

Iwasaki H.、Hirata Y. 等人：“机械拉伸通过表皮生长因子受体刺激血管平滑肌细胞的生长。”Am.J.Physicl.（Heart Ctrc.Physicl.）。

Doi M.,Hirata Y. et.al: "Suppression of integrin av expression by endothelin-1 in vascular smooth muscle cells."Hynaton.Res.. 23. 643-649 (2000)

Doi M.、Hirata Y. 等人：“血管平滑肌细胞中内皮素 1 抑制整合素 av 表达。”Hynaton.Res.. 23. 643-649 (2000)

平田結喜緒: "「アドリメデロリン」Annual Review内分泌代謝2000"中外医学社. 5 (2000)

Yukio Hirata：“‘Adrimederoline’年度回顾内分泌代谢2000”Chugai Igakusha 5 (2000)。