ハイブリッド型人工骨作製における成長因子の作用の検討

检查生长因子在混合人工骨生产中的影响

• 批准号: 12877323
• 负责人: 朝比奈 泉
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877323/
• 关键词: 組織工学; 人工骨; 成長因子; 骨形成たんぱく質; BMP

ヒト由来の細胞を用い組織工学的手法を用い、細胞ハイブリッド型人工骨の開発を目指した。まず、第一に骨牙細胞へと分化しうる細胞の採取法の検討を行った。1)ヒト歯髄由来間葉系幹細胞の分取われわれ口腔外科医が容易に入手可能な硬組織形成性細胞の入手源として歯髄組織を選択した。患者の同意のもとで、抜去した埋伏智歯より歯髄組織を採取し、ディスパーゼ、コラゲナーゼにより消化することにより、細胞を分離した。これをプラスティックシャーレに藩種し、付着した細胞を増殖回収した。2)in vitroにおける骨牙細胞誘導能の検討増殖した細胞を、アスコルビン酸、グリセロリン酸、デキサメタゾンの存在下で培養し、アルカリフォスファターゼ活性を指標として骨牙細胞(歯髄細胞)への分化能を検討した。その結果、ラット骨髄由来細胞と比較してほんの僅かであるが、デキサメタゾンの存在下ではアルカリフォスファターゼ活性の上昇を認めた。ついで、培養系にrhBMP-2を添加したところ、2-3倍程度アルカリフォスファターゼ活性は上昇した。反対に、FGF-2を添加するとアルカリフォスファターゼ活性は消失した。3)in vivo骨(象牙質)形成能の検討培養・増殖した細胞を多孔質ハイドロキシアパタイトに藩種し、3次元的培養を行った後、ヌードマウス皮下に移植した。4週後に摘出し組織学的検討を行ったが、ハイドロキシアパタイト内には線維性組織が入り込み硬組織の形成は認められなかった。今後、さらに培養方法、単体の検討が必要と思われた。

The development of cell-derived artificial bone is indicated by the use of tissue engineering techniques. The method of cell differentiation of the first bone and tooth cells was studied. 1) It is easy for oral surgeons to obtain mesenchymal stem cells from dental tissues, and it is possible to obtain hard tissue-forming cells from dental tissues. The patient agrees to take the medicine and digest it. This is the first time I've ever seen a cell. 2)In vitro, the induction of proliferation and differentiation of bone and tooth cells was studied in the presence of vitamin A, vitamin B and vitamin C. In the presence of a variety of enzymes, the activity of the enzyme is increased. In culture, rhBMP-2 was added to increase the activity of rhBMP-2 by 2-3 times. The addition of FGF-2 to the system results in a loss of activity. 3)In vivo bone (dentin) formation can be cultured, cultured and transplanted subcutaneously. After 4 weeks, the histological examination was carried out, and the linear tissue was formed into the hard tissue. In the future, it is necessary to think about the cultivation method and the single body examination.

项目成果

Md A lmuranul, I Asahina, K Takahashi, S Yokota, K, et al.: "Evaluation of ceramics composed of different hydroxyapatite to tricalcium phosphate ratios as carriers for rhBMP-2"Biomaterials. 22. 1643-1651 (2001)

Md A lmuranul、I Asahina、K Takahashi、S Yokota、K 等人：“评估由不同羟基磷灰石与磷酸三钙比例组成的陶瓷作为 rhBMP-2 的载体”生物材料。

Md.Imranul Alam: "Comparative study of biphasic calcium phosphate ceramics impregnated with rh BMP-2 as bone substitute."J of Biomedical Material Research. 54. 129-138 (2001)

Md.Imranul Alam：“用 rh BMP-2 浸渍的双相磷酸钙陶瓷作为骨替代物的比较研究。”生物医学材料研究杂志。

Md A lmuranul, I Asahina, K Omamiuda, S Enomto: "Comparative study of several biphasic calcium phosphate ceramics impregnated with rhBMP-2 as bone Substitutes"J Biomed Material Res.. 54. 129-138 (2001)

Md A lmuranul、I Asahina、K Omamiuda、S Enomto：“用 rhBMP-2 浸渍的几种双相磷酸钙陶瓷作为骨替代品的比较研究”J Biomed Material Res.. 54. 129-138 (2001)