肝臓特異的自己抗体測定法の開発

肝脏特异性自身抗体测定方法的开发

基本信息

批准号：
12877388
负责人：
網野信行
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877388/
关键词：
自己免疫性肝炎アルギナーゼ抗体 CYP2D6抗体肝機能異常慢性肝炎

项目摘要

自己免疫性肝炎の存在は、我が国では比較的珍しいものと従来から常識的に考えられてきた。しかし我が国の健康診断における肝機能異常を示すもののうち、50〜60%は脂肪肝であり、B型及びC型ウィルス肝炎は10〜15%程度である。残り約四分の一の症例では肝機能異常の原因がもうひとつよくわかっていない。その原因として、自己免疫性肝炎の良い診断法が確立されておらず、現在用いられている診断クライテリアは除外診断によるスコアリングシステムが適用されているためと考えられている。自己免疫疾患の診断基準は一般的に不可逆的な病態にまで発展した、比較的典型的な症例のみを把握するために作られたものが殆どである。自己抗体測定を中心にして各種臓器の自己免疫病態を考えると、潜在病態が意外に多いことが推測される。しかし、現在自己免疫性肝炎に関する自己抗体測定法は抗核抗体や抗平滑筋抗体が主流であり、汎用できる肝臓特異的自己抗体測定法はこれまで開発されていなかった。本研究で我々は、肝臓特異的自己抗体測定法の開発を試み、肝臓特異的な抗原としてヒト1型アルギナーゼをリコンビナントで作成し、それを用いてELISA法を開発した。この方法により抗アルギナーゼ抗体は自己免疫性肝炎のうちdefiniteタイプで18.2%、probableタイプで32.3%と予想外の高頻度で陽性であることが判明した。さらに、C型肝炎患者でも本抗体が20%の陽性であり、C型肝炎と自己免疫性肝炎の強い関連が示唆された。次いでチトクローム系酵素の一つ、CYP2D6に対する自己抗体測定法をradioligand assay法で開発した。CYP2D6抗体はdefiniteタイプで36.4%、probableタイプで44.4%とやはり予想外の高頻度で陽性を示し、C型肝炎でも25.0%と高頻度出現を見た。臓器アルギナーゼ自己抗体との組み合わせを行うと、自己免疫性肝炎の55%が確実に診断されることが明らかにされた。これらの研究を基に、自己免疫性肝炎の国際的にも新しい診断クライテリアが出来るものと確信された。

传统上，自身免疫性肝炎的存在在日本被认为相对罕见。但是，在日本健康检查中肝脏异常的病例中，脂肪肝脏为50-60％，丙型肝炎和C病毒约为10-15％。在剩余的大约四分之一的情况下，肝功能异常的原因尚不清楚。这被认为是由于尚未确定自身免疫性肝炎的良好诊断方法，并且目前使用排除诊断目前将目前使用的诊断标准应用于评分系统。通常已经开发出大多数自身免疫性疾病的诊断标准，以掌握相对典型的病例，具有不可逆转的病理学。考虑到各种器官的自身免疫性病理，重点是自身抗体测量，据估计，有许多潜在病理。但是，目前，抗核和抗滑动肌肉抗体是自身免疫性肝炎的主流方法，并且没有开发出通用肝特异性自身抗体测定法。在这项研究中，我们试图开发一种肝特异性自身抗体测定法，并重组产生人类1型精氨酸酶作为肝特异性抗原，并使用此方法开发了ELISA方法。该方法表明，抗精氨酸酶抗体意外阳性，其中18.2％的自身免疫性肝炎和32.3％的可能类型。此外，该抗体在丙型肝炎患者中也呈阳性，表明丙型肝炎和自身免疫性肝炎之间存在很强的关联。接下来，使用放射性物体测定方法开发了一种CYP2D6的自身抗体测定法（一种细胞色素酶）。 CYP2D6抗体是出乎意料的高频率，明确类型的抗体为36.4％，可能类型为44.4％，丙型肝炎C的高频为25.0％。已证明55％的自身免疫性肝炎是可靠地诊断出的，当时有55％的自身免疫性肝炎。基于这些研究，可以确认可以创建新的国际自身免疫性肝炎的诊断标准。