合成オリゴペプチドを用いたTSH受容体抗体の免疫測定法の開発と臨床応用

合成寡肽TSH受体抗体免疫测定方法的开发及临床应用

• 批准号: 03454506
• 负责人: 網野 信行
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454506/
• 关键词: TSH受容体; オリゴペプチド; バセドウ病; 受容体抗体; エンザイムイムノアッセイ; 自己抗体

TSH受容体の細胞膜外域及び細胞外ループ状領域の8種類のオリゴペプチドを合成し(hTSH RI:639-668(ループ),R2:560-580(ループ),R4:32-56,R5:352-383,R6:160-191,R7:90-122,R8:237-294,R9:310-342),バセドウ病及び橋本病患者血の免疫グロブリンとの結合能,FRTL-5細胞のcAMP産生への影響を調べ受容体抗体の作用部位を検索した。(1)免疫沈降反応;R6はバセドウ病検体と有意の結合の増加を示したが,R1,R3,R4,R7,R9は単独またはR6と混和した場合でも有意の増加を示さなかった。(2)固相化オリゴペプチドとの結合性;バセドウ病53例中5例が,橋本病でもTSH高値26例中4例がRIとの有意の特異的結合を示した。(3)hTSHによるFRTL-5細胞のcAMP産生に及ぼすペプチドの影響;今回どのペプチドもhTSHによるcAMP産生に有意な抑制作用はみられなかった。以上の結果より,受容体一抗体結合の検索には一次構造のみのオリゴペプチド使用では不十分で更に三次構造も考慮した蛋白構造の検討が必要と考えられた。

The synthesis of 8 kinds of selective cAMP in the extracellular domain and extracellular domain of TSH receptor (hTSH RI:639-668(R2:560-580(R2),R4:32-56,R5:352-383,R6:160-191,R7:90-122,R8:237-294,R9:310-342), the binding ability of TSH receptor in the immune system of patients with TSH and TSH,FRTL-5 cells produce cAMP, which affects the site of action of receptor antibodies. (1)R1,R3,R4,R7,R9 are individually and intentionally increased when R6 is mixed. (2)5 of 53 cases of HASHI had high TSH values, 4 of 26 cases had RI and intentional specific binding. (3) The cAMP production of FRTL-5 cells induced by hTSH was inhibited by the inhibition of cAMP production. As a result, the receptor-antibody binding model is necessary for the analysis of primary structure and secondary structure.

项目成果

金田 達成、玉置 治夫、日高 洋 網野 信行、光田 信明 谷澤 修、宮井 潔: "バセドウ病合併妊婦における血中甲状腺刺激活性の分析:甲状腺刺激性TSHレセプター抗体とヒト繊毛性ゴナドトロピンによる刺激活性の分別定量" 臨床病理. 40. 941-947 (1992)

Satoshi Kaneda、Haruo Tamaki、Hiroshi Hidaka、Nobuyuki Amino、Nobuaki Mitsuda、Osamu Tanizawa、Kiyoshi Miyai：“患有格雷夫斯病的孕妇的血液甲状腺刺激活性分析：甲状腺刺激 TSH 受体抗体和人纤毛促性腺激素的刺激活性的区分“定量临床病理学。40。941-947（1992）

Kashiwai T, Ichihara K,Endo Y,Tamaki H,Amino N,Miyai K: "Immunological and biological characteristics of recombinant human thyrotoropin." J Immunol Method. 143. 25-30 (1991)

Kashiwai T、Ichihara K、Endo Y、Tamaki H、Amino N、Miyai K：“重组人促甲状腺素的免疫学和生物学特性。”

玉置 治夫.網野信行: "甲状腺刺激ホルモン(TSH)レセプター抗体" 検査と技術. 19. 242-243 (1991)

Haruo Tamaki。Nobuyuki Amino：“促甲状腺激素 (TSH) 受体抗体”测试和技术。19. 242-243 (1991)。

玉置 治夫、戒能 通智、高田 薫 網野 信行、宮井 潔、遠藤 雄一 森山 毅、中島 敏博、今川 義孝: "TSH受容体オリゴペプチドを用いた受容体抗体の作用部位についての検討:免疫沈降法、ELISA法、生物活性中和法による比較" 内分泌学の進歩. 10. 182-183 (1993)

Haruo Tamaki、Michitomo Kaino、Kaoru Takada、Nobuyuki Amino、Kiyoshi Miyai、Yuichi Endo、Takeshi Moriyama、Toshihiro Nakajima、Yoshitaka Imakawa：“使用 TSH 受体寡肽研究受体抗体的作用位点：免疫沉淀、ELISA 10. 182-183 (1993)

Tamaki H, Amino N,Iwatani Y,Matsuzuka F,Kuma K,Miyai K: "Detection of thyroid microsomal and thyrotropin-receptor antibody and development of neonatal thyrotoxocosis." J Pediat Endcrinol. 4. 97-101 (1991)

Tamaki H、Amino N、Iwatani Y、Matsuzuka F、Kuma K、Miyai K：“甲状腺微粒体和促甲状腺素受体抗体的检测以及新生儿甲状腺毒症的发生。”