p16遺伝子導入による肺癌の遺伝子治療法の確立

导入p16基因建立肺癌基因治疗

• 批准号: 01F00326
• 负责人: 長嶋 和郎
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00326/
• 关键词: p16; NSCLC; confocal lazer-scanning microscopy; PCR; polyomavirus SV40; mesothelioma; asbestos

これまで行った個々の研究テーマとその結果、および考察を簡潔に述べる。1.ヒト非小細胞性肺癌(NSCLC)におけるがん抑制遺伝子p16の発現状況について:現在まで10例の肺癌に関してmonoclonal抗体(Clone G175-405,PharMingen, San Diego, CA)を用いて免疫染色を行った。その結果50%の症例においてがん細胞の核染色の陰性を認めた。このことは非小細胞性肺癌NSCLCの半数にp16遺伝子発現の消失が示された。2.ヒト肺癌における癌抑制遺伝子p16のプロモータ領域における発現抑制について:上記の結果よりp16遺伝子発現の消失が遺伝子の欠失や変異により消失した可能性のほかにepigenetic phenomenonとしてpromoter領域のCpGのmethylationによる可能性も示唆される。そこでmethylation-specific PCR法により検討した。その結果p16陰性の腫瘍の殆どにCpGのmethylationが認められた。3.胸膜中皮腫におけるSV40ウイルス遺伝子の関与について:胸膜中皮腫の発生にサルpolyomavirus SV40の関与が示唆されているが、反対論も多くいまだ結論が出ていない。欧米ではSV40が混入したpoliovaccineを使用していた経緯があり、その感染により腫瘍発生が発生したというのがSV40関与の根拠である。わが国で胸膜中皮腫を発生した高齢者は全てpoliovaccineを受けていないので、SV40の関与の有無を検討する上で貴重である。現在まで5症例について病理学的検討を加え、SV40検出のprimerを設計して、検討の準備を進めている。4.癌の組織診断と細胞診断に関する検討:種々のヒトがん細胞を病理組織学的および細胞学的に鑑別診断することを学び、さらにconfocal microscopyを用いており診断精度を高めることを研究している。

The results of this study are summarized in brief. 1. Immunostaining was performed with monoclonal antibody (Clone G175-405,PharMingen, San Diego, CA) in 10 cases of NSCLC. 50% of the cases were negative for nuclear staining. The p16 gene has disappeared in half of NSCLC patients. 2. In lung cancer, the occurrence and suppression of cancer suppressor gene p16 in the promoter domain: the results described above indicate the occurrence and disappearance of p16 gene, the absence and disappearance of p16 gene, and the possibility of CpG methylation in the promoter domain. The methylation-specific PCR method was used for detection. Results p16-negative tumors were identified by CpG methylation. 3. The relationship between SV 40 and polyomavirus SV40 in pleural mesothelioma development is discussed. The SV 40 is mixed with poliovine and is used in the infection. In the case of pleural swelling, the relationship between SV40 and the presence or absence of SV40 is discussed. Now we have 5 cases to investigate pathology, SV40 to detect the primer design, investigation preparation and progress. 4. Tissue diagnosis of cancer and cell diagnosis related to the study: species, pathology, histology, cytology, differential diagnosis, study, confocal microscopy, high diagnostic accuracy.