权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ES細胞のにおけるOct-3/4の機能制御因子の探索

在 ES 细胞中寻找 Oct-3/4 的功能调节因子

基本信息

批准号：
01J06303
负责人：
赤木紀之
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J06303/
关键词：
ES細胞自己複製 Oct-3 4 DAX-1 STAT3 Zfp57

项目摘要

マウスES細胞はLIF存在下で自己複製する。その自己複製には、STAT3の活性化及びOct-3/4の発現が必須である。本研究ではES細胞の自己複製の分子機構を解明する目的で、Oct-3/4と結合する因子をyeast two-hybrid法により検索した。その結果、Oct-3/4と結合する因子として核内ホルモン受容体に属する転写因子DAX-1を得た。この両者の結合は共免疫沈降法からも確認された。またDAX-1の発現がLIFにより維持されることから、その下流の転写因子であるSTAT3とOct-3/4のどちらで制御されているか検討した。まず、STAT3のドミナントネガティブ変異体をES細胞に過剰発現させると、DAX-1 mRNAの発現量が減少した。またSTAT3ER ES細胞株で4HT除去によるSTAT3の不活性化によっても発現量が減少した。次にテトラサイクリン(Tet)の添加によりOct-3/4の発現が停止するZHBTc4 ES細胞株では、Tet添加によりDAX-1 mRNAの発現は速やかに停止し、その後Tetを除去し再びOct-3/4の発現を回復させるとDAX-1の発現も回復することを見出した。これはDAX-1の遺伝子発現が、STAT3とOct-3/4の両者により調節されていることを示唆している。このことより、2つの転写因子の下流に存在するDAX-1が、自己複製に重要な役割を担っている可能性が考えられる。

MASES cells can replicate themselves in the presence of LIF. Self-replication, STAT3 activation and Oct-3/4 activation are necessary. In this study, the molecular mechanism of self-replication of ES cells was clarified, and the purpose of this study was to explain the purpose, Oct-3/4 and binding factors, and to use the yeast two-hybrid method. As a result, the Oct-3/4 binding factor and the intranuclear receptor were obtained by writing the factor DAX-1.この両のcombinationはcoimmunosedimentationからもconfirmationされた.またDAX-1の発成がLIFにより maintained されることから、そのdegradable の転写真词子であるSTAT3とOct-3/4のどちらでcontrolされているか検椟した. The amount of DAX-1 mRNA has been reduced, and the amount of ES cells has been reduced. In the STAT3ER ES cell line, 4HT was used to remove and inactivate STAT3, and the current amount was reduced.にテトラサイクリン(Tet)のaddedによりOct-3/4の発appears to stopするZHBTc4 ES cell strainでは、Tet addedによりDAX-1 mRNAの発appearsはspeedやかにstopし、その后Tetをremoveし againびの発appearsをreplyさせるとDAX-1の発appearsもreplyすることを见出した.これはDAX-1の伝子発 appearが, STAT3とOct-3/4の両者により Adjustmentされていることをshows instigationしている.このことより, 2つの転WRITING FACTOR の obscene existence するDAX-1が, copy yourself にimportant なservice cut を聣ているpossibility がtest えられる.