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催熟ウナギ雌の脳下垂体の成熟への関与に関する内分泌学的研究

垂体参与雌性鳗鱼成熟的内分泌学研究

基本信息

批准号：
01J10618
负责人：
井尻成保
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの脳下垂体除去雌ウナギの催熟実験によって、通常のウナギ人為催熟には、ウナギ自身の脳下垂体は必ずしも必要ではないことがあきらかとなった。本年度は、主要なステロイド合成酵素の抗体を作製し、タンパクレベルでの発現制御の解明、および未だ単離されていないステロイド合成酵素の単離を目指した。1)20β-HSD遺伝子の単離:他魚種で20β-HSDとして単離されているカルボニル還元化酵素はウナギでは20β-HSD活性を持たなかったことから他のタイプが存在すると仮定して、機能発現クローニングを試みたが20β-HSD活性を持つ遺伝子を単離するには至らなかった。2)P450c11の免疫組織化学的局在:ウナギP450c11組替タンパクに対する特異抗体を作製し、ウナギ組織を免疫染色した結果、頭腎のステロイド合成細胞および精巣のライディッヒ細胞が良好に染色されたが、卵巣に陽性細胞は観察されなかった。この時期卵巣のP450c11 RNAの発現は高い為、矛盾する結果となった。3)P450scc、P450c17、P450c11のmRNAの局在:卵巣ではscc、c17ともにmRNAはタンパクと同時期、同部位に発現していた。精巣では催熟開始直後に発現が高まるも、以降ほとんど発現は認められず、scc、c17ともタンパクが一貫して発現している様子とは異なった。精巣のc11に関しては催熟開始9日目にmRNA、タンパクともにほぼ同時期に発現していた。以上、これまでにニホンウナギのFSH、サケFSH、P450scc、P450c17、P450arom、P450c11の特異抗体を作製し、免疫組織化学的観察を行った。これまでの結果、ウナギ雌の人為催熟にはウナギ自身の脳下垂体は必ずしも必要でなく、つまり様々なステロイド合成酵素は注射されるサケ下垂体によって発現が促進されている者と考えられた。そのステロイド合成酵素の発現制御も各々異なるとが示唆された。

Last year's pituitary gland removal female ウナギのripening 実験によって, usual のウナギartificial ripeningには, ウナギ own の脳 pituitary gland は必ずしもNecessary ではないことがあきらかとなった. This year, the main production of antibodies for synthetic enzymes and enzymes for this year, and the production of タンパクレベルでの発Control the solution of the disease, the control of the enzyme, and the synthesis of enzymes. 1) 20β-HSD 缝子の単　: Other fish species で 20β-HSD 　　　　　　　　　れているカルボニルreducing enzyme はウナギでは20β-HSD active をholdたなかったことから　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　をTest the activity of 20β-HSD in みたがをhold the remaining 伝子を単里するには to らなかった. 2) The results of P450c11 immunohistochemistry: P450c11 specific antibody production and tissue immunostainingしたRESULTS、Head Kidney Synthetic Cells The cells are well stained and the eggs are positive. The cells are stained well. During the period, P450c11 RNA has a high appearance and a contradictory result. 3) The location of P450scc, P450c17, and P450c11 mRNA is: ovary scc, c17 mRNA is at the same time and in the same part. The ripening process of semen has begun, and the process of ripening has begun. , scc, c17 ともタンパクが consistent して発appears している様子とはdifferent なった. The ripening process of Seikitsu no c11 is started on the 9th day, and the ににmRNA and タンパクともにほぼ are present at the same time. Above, the production of specific antibodies of これまでにニホンウナギFSH, サケFSH, P450scc, P450c17, P450arom, P450c11, and immunohistochemistry were carried out. The result of これまでの, ウナギ女のartificially ripened にはウナギown の脳 pituitary body は必ずしもNecessary でなく, つまり様々なステロイドSynthetic enzymeはInjectionされるサケThe pituitary gland によって発appears to promote されている人と考えられた.そのステロイドsynthetic enzyme の発开秂もeach々differentなるとが说憆された.