線状1gA水疱性皮膚症と1gA天疱瘡の動物モデルの作成

线性1gA大疱性皮肤病和1gA天疱疮动物模型的建立

• 批准号: 12670846
• 负责人: 濱田 尚宏
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12670846/
• 关键词: 線状IgA水疱性皮膚症; IgA天疱瘡; 免疫ブロット法; デスモコリン; デスモグレイン; 水疱性類天疱瘡抗原; デスモソーム; ヘミデスモソーム

線状IgA水疱性皮膚症(LAD)のIgA抗体の反応する抗原は通常の表皮抽出液を用いた免疫ブロット法では検出できないため、まず、培養表皮細胞上清から精製したサンプルを用いた新しい免疫ブロット法を確立し、大多数のLAD血清が120kDa抗原と反応することを証明した。この抗原の詳細を知るためにBP180のC15部位の大腸菌リコンビナント蛋白を作製し、それを用いた免疫ブロット法で、多くのLAD血清がこの蛋白と反応することを示した。これは120kDa抗原がBP180の一部であり、LADは特殊なコラーゲン様部位と特異的に反応することを示唆した。次ぎに、ヒト真皮抽出液を用いた免疫ブロット法で一部のLAD血清はVII型コラーゲンに反応することを示した。また、IgA天疱瘡の抗原をさらに詳細に解析するために、デスモコリン(Dsc)のcDNAの有核細胞トランスフェクション法とIgA抗体用のDsg1/Dsg3ELISAを開発し、すべてのSPD型のIgA天疱瘡がDsc1と反応し、一部の血清はDsg1/Dsg3に反応することを示した。マウス皮膚切片を用いた蛍光抗体法によりすべてのIgA天疱瘡患者血清が実際に新生マウス皮膚に反応したことから、新生マウスを用いた実験系が可能であることを確認した。その後、多量のIgA天疱瘡患者血清を濃縮して作製した高抗体価の抗体サンプルを新生マウスの背部皮下に投与し、1日後から4日後まで、定期的にマウスを検索した。マウスの皮膚を蛍光抗体法で免疫組織学的に検索しIgAが表皮上層の表皮細胞間に沈着していることを確認。現在、組織学的に好中球の浸潤ならびに表皮の損傷の程度を検討中である。さらに免疫電顕にて検索する予定である。今後、この実験系を用いて、補体・好中球・サイトカイン、特にIL5,IL6の役割について検討し、これらの自己抗体が実際に病原性を有するか否かを検討する。

IgA vesicular dermatosis (LAD): IgA antibody anti-antigen. Usually, the epidermis extract is used to immunize the supernatant of the epidermis. The supernatant of the epidermis is purified, and the supernatant of the epidermis is cultured. The new antibody is immunized, and most of the LAD serum antigens are 120kDa antigens. The antigen was detected in BP180 C15, the protein was used as antigen, the immune method was used, and the protein in serum of LAD was detected. One hundred and twenty kDa antigens, BP180, and LAD antigens, specific antigens, antigens. The dermis extract was immunized with LAD sera, serotype VII, antidermis and anti-dermis. The antigens of pemphigus and IgA pemphigus were analyzed by Elisa, and the antibodies were detected by Dsg1/Dsg3ELISA, SPD IgA pemphigus and Dsc1, and one serum Dsg1/Dsg3 was detected by Dsg1/Dsg3ELISA, Dsg1/Dsg3ELISA, and Dsg1/Dsg3, respectively. The sera of patients with IgA pemphigus were examined by photoantibody method, and the serum of patients with pemphigus was detected by photoantibody method. The sera of patients with large amount of IgA pemphigus were injected subcutaneously on the back, 1 day later, 4 days later, and regularly. The immunological method was used to detect the intercellular sedimentation on the epidermis of IgA. At present, the histology of the ball is good, and the degree of the epidermis is in the middle. The immuno-electric test was used to determine the predetermined dose. From now on, you will find that your body is good, and your body is infected with your own antibodies. In the future, you will find that you have the pathogenicity of your own antibodies.

项目成果

Hamada T,Hashimoto T et al: "Bullous pemphigoid sera react specifically with various domains of BP230, most frequently with C-terminal domain, by immunoblot analyses using bacterial"Exp Dermatol. (in press).

Hamada T、Hashimoto T 等人：“通过使用细菌”Exp Dermatol 进行免疫印迹分析，大疱性类天疱疮血清与 BP230 的各个结构域发生特异性反应，最常见的是 C 末端结构域。

Hashimoto T et al: "Subcorneal pustular dermatosis type of IgA pemphigus : Demonstration of autoantibodies to desmocollin-1 and clinical review"Br J Dermatol. 143. 144-148 (2000)

Hashimoto T 等人：“IgA 天疱疮的角层下脓疱性皮肤病类型：desmocollin-1 自身抗体的演示和临床回顾”Br J Dermatol。

Hashimoto T et al: "Desmogleins are targeted by IgA autoantibodies of a few IgA pemphigus patients"Arch Dermatol. (in press).

Hashimoto T 等人：“桥粒芯糖蛋白是少数 IgA 天疱疮患者的 IgA 自身抗体的目标”Arch Dermatol。

Hashimoto T et al: "Identification of desmoglein 1 as an autoantigen in a patient with intraepidermal neutrophilic IgA dermatosis type of IgA pemphigus"Exp Dermatol. 9. 224-228 (2000)

Hashimoto T 等人：“在患有 IgA 天疱疮的表皮内中性粒细胞 IgA 皮肤病类型的患者中将桥粒芯糖蛋白 1 鉴定为自身抗原”Exp Dermatol。

橋本隆: "医学書院、東京"皮膚科専門医Clinical Exercises、第一版. 182 (2001)

Takashi Hashimoto：“东京 Igakushoin”皮肤科医生临床练习，第 1 版 182 (2001)。