トランスジェニックナミテントウを用いた昆虫翅の多様性のメカニズムの解析

转基因纳米瓢虫昆虫翅膀多样性机制分析

• 批准号: 13045017
• 负责人: 新美 輝幸
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045017/
• 关键词: 形質転換体; ナミテントウ; 翅; 多様性

RT-PCR法により、数種の無翅昆虫及び有翅昆虫より、vestigial(vg)とscalloped(sd)の部分配列を得た。次に、無翅昆虫および有翅昆虫から得たvg cDNAをショウジョウバエに導入し、異所的な翅形成能を調査したところ、有翅昆虫のVGのみならず、無翅昆虫のVGも異所的な翅を誘導した。以上の結果より、無翅昆虫が出現した時点で既にVGとSDが存在しており無翅昆虫のVGは既に潜在的に翅形成に必要な機能を有する分子であったと考えられる。従って、無翅昆虫から有翅昆虫へと進化した際に、VGおよびSDの発現時期・部位の変化や、VG/SD複合体の標的遺伝子の変化が、翅獲得に重要なステップであったと推察される。数種昆虫から翅形成遺伝子群をRT-PCRによりcDNAの部分配列をクローニングした。いずれの昆虫においても遺伝子の配列は非常に高く保序されていた。抗体染色法により、数種昆虫の翅原基における発現パターンを調査し比較したところ、翅の形態が著しく異なる鞘翅目、鱗翅目、双翅目の昆虫はいずれも蛹になる以前の翅原基では、翅の基本的なパターン形成に関与する遺伝子の発現は進化的に保存されていることが明らかとなった。GFPを形質転換マーカーに用いたピギーバックベクターにより、形質転換ナミテントウの作出に成功した。形質転換効率は、3.7%であった。また、ナミテントウにおいてもRNAiによる遺伝子機能阻害が有効であることが明らかとなった。遺伝子の異所的な発現誘導系による遺伝子の機能解析を行うため、テトラサイクリンOFFシステムを用いたピギーバックベクターを作製した。さらに、遺伝子発現をレポーター遺伝子の発現によりモニターするピギーバックベクターの作製も行った。

The RT-PCR method によ によ, several species of wingless insects and び winged insects よ よ, vestigial(vg)とscalloped(sd) assigning を to た. Time に, wingless insects お よ び winged insects か ら have た vg cDNA を シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ に import し な wings can form を survey, different し た と こ ろ, winged insects の vg の み な ら ず, wingless insects の vg も な wing を induced by different し た. の above results よ り, wingless insects が し た point で に both VG と SD が exist し て お り wingless insects の VG は に both potential formation に な necessary function を に wing is す る molecular で あ っ た と exam え ら れ る. 従 っ て, wingless insects か ら winged insects へ と evolution し た interstate に, VG お よ び SD の の 発 now period, parts - や, VG/SD complex の mark heritage 伝 son の に important variations が, wing な ス テ ッ プ で あ っ た と push examine さ れ る. Several species of insects か ら wing form heritage 伝 subgroup を rt-pcr に よ り cDNA の department assign column を ク ロ ー ニ ン グ し た. Youdaoplaceholder0 ずれ <s:1> insects にお にお て て 伝 伝 offspring <s:1> are arranged く very に high く conserving order されて た た た. Antibody staining に よ り primordium, several kinds of insect の wing に お け る 発 now パ タ ー ン を し compare し た と こ ろ, wing の form が し く different な る coleoptera, lepidoptera, diptera insects の は い ず れ も pupa に な る の wing primordium before で は, wing の basic な パ タ ー ン form に masato and す る heritage 伝 son の 発 は evolutionary に now save さ れ て い る こ と が Ming ら となった となった. GFP を form quality planning in マ ー カ ー に with い た ピ ギ ー バ ッ ク ベ ク タ ー に よ り, form quality planning in ナ ミ テ ン ト ウ の make に successful し た. Shape and mass 転 conversion rate 転, 3.7%であった. ま た, ナ ミ テ ン ト ウ に お い て も RNAi に よ る heritage 伝 son function resistance against が unseen で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. But son 伝 の vision by な 発 induction system now に よ る heritage 伝 son の line function analytical を う た め, テ ト ラ サ イ ク リ ン OFF シ ス テ ム を with い た ピ ギ ー バ ッ ク ベ ク タ ー を cropping し た. さ ら に, but 伝 発 now を レ ポ ー タ ー posthumous son 伝 の 発 now に よ り モ ニ タ ー す る ピ ギ ー バ ッ ク ベ ク タ ー の cropping も line っ た.

项目成果

Moribe, Y.: "Samui, a novel cold-inducible gene, encoding a protein with a BAG domain similar to silencer of death domains(SDDD/BAG-4), isolated from Bombyx diapause eggs"Eur. J. Biochem.. 268. 3432-3442 (2001)

Moribe, Y.：“Samui，一种新型冷诱导基因，编码具有与死亡域沉默子 (SDDD/BAG-4) 相似的 BAG 域的蛋白质，从家蚕滞育卵中分离出来”Eur.