器官形成・再生制御システムとしてのコラーゲンの遺伝子発現のフィードバック制御機構

胶原基因表达作为器官形成/再生控制系统的反馈控制机制

• 批准号: 13045046
• 负责人: 畑 隆一郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045046/
• 关键词: コラーゲン; 形態形成位置情報; 接着シグナル; インテグリン; 転写制御

我々は細胞を囲む細胞外マトリックスの骨格をなすコラーゲンはその立体構造により細胞のコラーゲン遺伝子の発現と増殖とをフィードバック制御をすることを明らかにしてきた。本実験では細胞の位置情報認識応答機構を明らかにするために、I型コラーゲン遺伝子に存在すると考えられる2次元或いは3次元位置情報認識応答配列の解析を行った。ヒトα1(I)鎖遺伝子の上流領域(プロモーター)に第一イントロンの配列をプロモーターの上流、下流、およびレポーター遺伝子であるホタルのルシフェラーゼ遺伝子の下流にin situの遺伝子配列と同じ方向(正方向)或いは逆方向に結合した各種レポーター遺伝子コンストラクトを合成した。これをヒト皮膚線維芽細胞にトランスフェクトした後に細胞を2次元のコラーゲン上または3次元のコラーゲンゲル内で培養後細胞を集め、ルシフェラーゼ活性の測定によりコラーゲン遺伝子の転写活性への影響を調べた。その結果、2次元のコラーゲン上に培養した場合にはin situの遺伝子配列と同様に第一イントロンの配列をプロモーターの下流に正方向に結合したコンストラクトで有意な転写活性促進が検出された。また、3次元のコラーゲンゲル内に培養した場合も第一イントロンの配列をプロモーターの下流に正方向に結合したコンストラクトで有意な転写活性抑制が検出された。これらの結果からヒトI型コラーゲンα1(I)鎖遺伝子の第一イントロンには細胞の周囲の細胞外マトリックスの立体構造を認識し、α1(I)鎖遺伝子の転写を制御する位置情報認識応答配列の存在することが示された。この認識応答配列の解析と転写制御機構を明らかにすることにより形態形成における細胞による位置情報認識応答の分子機構が明らかにできると考えられる。

I 々 は cells を 囲 む extracellular マ ト リ ッ ク ス の bone を な す コ ラ ー ゲ ン は そ の three-dimensional structure に よ り cells の コ ラ ー ゲ ン heritage 伝 son の 発 と now raised colonization と を フ ィ ー ド バ ッ ク suppression を す る こ と を Ming ら か に し て き た. This be 験 で は cells の location intelligence know 応 answer institutions を Ming ら か に す る た め に, type I コ ラ ー ゲ ン heritage 伝 son に exist す る と exam え ら れ る 2 yuan or い は three dimensional position information know 応 a match column line analytical を の っ た. ヒ ト alpha 1 (I) lock heritage 伝 son の upper area (プ ロ モ ー タ ー) に first イ ン ト ロ ン の match column を プ ロ モ ー タ ー の upper-class, filthy, お よ び レ ポ ー タ ー posthumous son 伝 で あ る ホ タ ル の ル シ フ ェ ラ ー ゼ 伝 の obscene に son in Situ の heritage 伝 with sequence と with じ direction (positive direction) or い は に combined with inverse direction し た various レ ポ ー タ ー heritage 伝 son コ ン ス ト ラ ク ト を synthetic し た. こ れ を ヒ ト skin line d bud cells に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し た を に cells after 2 dimensional の コ ラ ー ゲ ン on ま た は 3 dimensional の コ ラ ー ゲ ン ゲ ル を で training after the cells within the set め, ル シ フ ェ ラ ー ゼ determination of active の に よ り コ ラ ー ゲ ン heritage 伝 son の planning write activity へ の influence を adjustable べ た. そ の results, 2 dimensional の コ ラ ー ゲ nurturing に ン し た occasions に は in situ の heritage 伝 with sequence と with others in the first イ に ン ト ロ ン の match column を プ ロ モ ー タ ー の obscene に positive direction に combining し た コ ン ス ト ラ ク ト で intentionally な planning write activity to promote が 検 out さ れ た. ま た, 3 dimensional の コ ラ ー ゲ ン ゲ ル に training within し た occasions も first イ ン ト ロ ン の match column を プ ロ モ ー タ ー の obscene に positive direction に combining し た コ ン ス ト ラ ク ト で intentionally な planning write activity of が 検 out さ れ た. こ れ ら の results か ら ヒ ト type I コ ラ ー ゲ ン alpha 1 (I) lock heritage 伝 の first son イ ン ト ロ ン に は cells の weeks 囲 の extracellular マ ト リ ッ ク ス の three-dimensional structure を know し, alpha 1 (I) the lock but 伝 の planning write を suppression す る location information between す 応 answer match column の る こ と が shown さ れ た. こ の know 応 a match column の parsing と planning system of writing imperial institutions を Ming ら か に す る こ と に よ り morphogenetic に お け る cells に よ る location intelligence know 応 answer の molecular institutions が Ming ら か に で き る と exam え ら れ る.

项目成果

畑 隆一郎: "I型コラーゲンの遺伝子多型と結合組織の複合遺伝子病"細胞工学. 20. 592-597 (2001)

Ryuichiro Hata：“I 型胶原蛋白的遗传多态性与结缔组织的复杂遗传病”《细胞工程》20. 592-597 (2001)。

Kato, Y., et al., Hata, R.: "Induction of SPARC by VEGF in human vascular endothelial cells"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 287. 422-426 (2001)

Kato, Y. 等人，Hata, R.：“人血管内皮细胞中 VEGF 诱导 SPARC”Biochem。

畑 隆一郎: "生体機能分子データーブック"中外医学社. 371 (2001)

羽田龙一郎：《生物功能分子数据书》中外医学社 371 (2001)。

Furue M., Zhang Y., Okamoto T., Hata R., Asashima M.: "Activin A induces expression of rat Sel-1l mRNA, a negative regulator of Notch signaling, in rat salivary gland-derived epithelial cells"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 282. 745-749 (2001)

Furue M.、Zhang Y.、Okamoto T.、Hata R.、Asashima M.：“激活素 A 在大鼠唾液腺来源的上皮细胞中诱导大鼠 Sel-1l mRNA（Notch 信号传导的负调节因子）的表达”Biochem。

Hata, R., Izukuri, K., Furue, M., Kato, Y., Koshika, S.: "Complex gene diseases of the connective tissue"Connective Tissue. 33. 9-16 (2001)

Hata，R.，Izukuri，K.，Furue，M.，Kato，Y.，Koshika，S.：“结缔组织的复杂基因疾病”结缔组织。