血清レクチンMBPの制がん作用に関する研究

血清凝集素MBP抗癌作用研究

• 批准号: 13214053
• 负责人: 川嵜 敏祐
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214053/
• 关键词: マンナン結合タンパク質(MBP); MBP依存的細胞性細胞傷害作用(MDCC); レクチン; フコース; 糖鎖構造解析

本年度はMBP依存的細胞性細胞傷害作用の起点となるがん細胞表面のMBP結合性糖鎖リガンドの性質について糖タンパク質および糖鎖のレベルで解析した。SW1116細胞にFITC標識MBPを結合させ、この結合量をフローサイトメトリーで測定した。SW1116細胞をN-グリコシド型糖鎖の生合成阻害剤であるツニカマイシン存在下で前処理するとFITC標識MBPの結合は約半分に減少した。一方、O-グリコシド型糖鎖の生合成阻害剤であるベンジル-アルファ-N-アセチルガラクトサミンで処理した場合も同様にFITC標識MBPへの結合は約半分に減少した。この結果は、SW1116細胞表面のMBPリガンドはN-グリコシド型糖鎖上およびO-グリコシド型糖鎖上にほぼ等量発現していることを示している。次に特異性の明らかな様々な植物レクチンを共存させ、その阻害効果を測定した。その結果、フコースに特異的なAALレクチンにより著しい阻害効果が観察されたが、マンノース、グルコースを認識するConAやLCA、また、ガラクトースを認識するPNAでは全く阻害がみられなかった。この結果は、MBPの結合にはフコースが重要であることを強く示唆している。さらに、SW1116細胞より糖鎖を調製し、糖鎖の還元末端をピリジルアミノ化標識して、MBPアフィニティクロマトグラフィー、糖組成分析、還元末端糖分析、各種グリコシダーゼ処理、質量分析計、NMR分析などの手法を用いて糖鎖構造の解析を進めている。これまでに得られた結果は、SW1116細胞由来のMBPリガンドはGalbeta1-4GlcNAcの繰り返し構造をも持つ高分子糖鎖であり、しかも多くのフコース置換をもつ、これまでに報告のない新しい型の糖鎖であることを示している。

This year, the origin of MBP-dependent cellular injury was analyzed by the properties of MBP-binding glycoproteins on cell surfaces. SW1116 cells were labeled with FITC and the binding amount was determined. In SW1116 cells, the inhibition of N-linked glycogen synthesis decreased by about half in the presence of FITC. In addition, the synthesis inhibition of a single, O-and N-type carbohydrate chain was reduced by about half in the same case. The results showed that MBP protein on SW1116 cell surface was expressed in equal amounts on N-and O-linked glycosites. Second, the specificity of the plant is determined by the coexistence of the plant and the plant. The results are as follows: 1. The AAL and the PNA are specific to each other. 2. The AAL and the PNA are completely different. The result is that MBP is very important. In addition, SW1116 cells were used to modulate the glycan chain, identify the glycan chain end, analyze the sugar composition, analyze the glycan chain end, process various glycan chains, analyze the mass spectrometer, and analyze the glycan chain structure. The results showed that SW1116 cells derived from MBP and Galbeta1-4GlcNAc had the structure of a polymer carbohydrate chain.

项目成果

T.V-Jensen et al.: "Recombinant expression of human mannan-binding lectin"Int. Immunopharm.. 1(4). 677-687 (2001)

T.V-Jensen 等人：“人甘露聚糖结合凝集素的重组表达”Int。

A.Ikeda et al.: "Mixed Lineage Kinase LZK Forms a Functional Signaling Complex with JIP-1, a Scaffold Protein of the c-Jun NH2-terminal Kinase Pathway"J.Biochem. 130(6). 773-781 (2001)

A.Ikeda 等人：“混合谱系激酶 LZK 与 JIP-1（c-Jun NH2 末端激酶途径的支架蛋白）形成功能信号复合物”J.Biochem。

R.Katsuyama et al.: "Expression of Macrophage Asialoglycoprotein-Binding Protein Is Induced through MAPK Classical Pathway"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 280(5). 1269-1273 (2001)

R.Katsuyama 等人：“通过 MAPK 经典途径诱导巨噬细胞去唾液酸糖蛋白结合蛋白的表达”Biochem。

A.Ikeda et al.: "Identification and characterization of functional domains in a mixed lineage kinase LZK"FEBS Lett.. 488(3). 190-195 (2001)

A.Ikeda 等人：“混合谱系激酶 LZK 中功能域的识别和表征”FEBS Lett.. 488(3)。

S.Yamamoto, S.Oka: "Glucuronyltransferases involved in the HNK-1 carbohydrate epitope biosynthesis"Trends in Glycoscience and Glycotechnology. 13(70). 193-208 (2001)

S.Yamamoto、S.Oka：“参与 HNK-1 碳水化合物表位生物合成的葡萄糖醛酸转移酶”糖科学和糖技术的趋势。