权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

がんを好発するSmad3欠損マウスを用いたTGF-β作用に関する血管生物学的解析

使用经常患癌症的 Smad3 缺陷小鼠对 TGF-β 作用进行血管生物学分析

基本信息

批准号：
13216018
负责人：
横手幸太郎
金额：
$ 2.94万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

TGF-βのシグナル伝達に関わる主要分子のノックアウトマウスとして唯一成熟個体を得ることができるSmad3ノックアウトマウス(以下Smad3 KO)を用い、血管生物学的解析を行なった。まず、C57BL/6系統のSmad3 KOを作成した。このマウスから酵素法により大動脈平滑筋細胞を単離培養することに成功した。ボイデンチャンバー変法によるケモタキシスアッセイを行なったところ、Smad3分子を欠く平滑筋細胞は野生型細胞に比べ、TGF-βに対する遊走反応が最大約70%増強していた。つまり、マウス平滑筋細胞にはSmad3以外の遊走を媒介するシグナルが存在し、Smad3はむしろ遊走抑制的に働くことが示唆された。これに対してマウス単球の遊走にはSmad3が必須であることから、TGF-βの細胞遊走に必要なシグナルは細胞の種類によって異なるものと思われた。また無血清処理にてストレスファイバーを消失させた平滑筋細胞をTGF-βで刺激し、ファロイジン染色で細胞内アクチン線維の構造変化を検討した。野生型平滑筋細胞では4時間のTGF-β刺激によりストレスファイバーの出現を認めた。一方、Smad3KO平滑筋細胞では、TGF-β添加によるストレスファイバー形成反応が欠如し、Smad3経路がRhoの活性化をもたらすことが示唆された。野生型とSmad3KOを用いたマトリゲルプラグアッセイから、TGF-βはマトリゲル内への血管新生を阻害し、その作用はSmad3により媒介されることがわかった。このほか、ローズベンガル色素の血管内投与と光照射により血管内皮傷害・内膜肥厚を誘導するモデルを確立し、Smad3KOを用いた血管壁リモデリングの解析を開始した。またアポEKOとのダブルノックアウトマウスを作成し、高コレステロール食負荷実験の基礎検討に着手している。

The main molecular weight of TGF- β-DNA has reached the level of the main molecule, and the only mature individual has been successfully identified as the only mature one. The following Smad3 KO is used to analyze the vascular biology of the only mature individual. The C57BL/6 system and the Smad3 KO system are used to complete the system. In the enzyme method, the smooth muscle cells were isolated and cultured successfully. In this study, we found that there were significant differences in the number of smooth muscle cells and wild type cells of Smad3 molecules, and that of TGF- β molecules. The maximum concentration was about 70%. The media other than Smad3, the presence of the media, the inhibition of the movement of the Smad3, the inhibition of the movement of the muscle, the presence of the medium, the presence of the smooth muscle cell, the medium, the presence, the inhibition, the inhibition. If you want to go to Smad3, you have to make sure that you have to pay attention to the number of cells you need to know, and you have to pay attention to the number of cells you need to know. The serum was stained with TGF- β, the smooth tendon cells were stimulated, and the cells were stained with cytoplasm. The wild type smooth muscle cell was activated by TGF- β in 4 hours, and the positive reaction was detected. On the one hand, the Smad3KO smooth tendons are cellular, and the addition of TGF- β leads to the formation of a negative response, and the Smad3 path indicates that it is instigated. The wild type "Smad3KO" was used to induce angiogenesis, such as TGF- β, TGF- β, angiogenesis, Smad3, vector, and so on. After intravascular injection and light irradiation, the endothelium-induced intimal hypertrophy was induced. Smad3KO was used to determine the location of the vascular wall. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do.