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Rho標的蛋白質による細胞悪性化と細胞移動の分子機序の解析

Rho靶蛋白诱导细胞恶性和细胞迁移的分子机制分析

基本信息

批准号：
13216054
负责人：
石崎敏理
金额：
$ 3.01万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216054/
关键词：
Rho アクチン細胞骨格微小管細胞接着斑 ROCK mDia 細胞移動極性

项目摘要

低分子量G蛋白質Rhoは、アクチン細胞骨格の再編成を介して細胞移動・接着を調節しており、ガン細胞の浸潤転移へもその関与が示されている。また、Rhoは細胞悪性化への関与も示されており、Rhoを介するシグナル伝達経路の解明は、がん細胞の生物特性を知る上で極めて重要な情報を提供することが期待される。本年度の主たる研究成果および経過は、(1)Rho-Rac間のシグナルクロストーク(2)Rho標的蛋白質mDia、ROCKの微小管配向、安定化への寄与とその局在である。(1)リゾフォスファチジン酸で血清飢餓状態のSwiss3T3細胞を刺激すると、ストレス線維、細胞接着斑の形成される。C3酵素で前処理しておくと、これら構造は形成されない。ROCK阻害薬Y-27632でも、ストレス線維、細胞接着斑の形成は阻害されるが、これに加え、細胞周囲にmembrane rufflilngが観察される。このrufflingはRacのdominant negative体を発現させることにより抑制されるから、Rac依存的なものである。この結果はRhoからRacへのシグナル伝達機構の存在を示唆するものである。また、そのシグナル伝達経路にCas並びにRho標的蛋白質mDiaが関与することを見い出した。(2)HeLa細胞にmDiaの部分欠失変異体(活性化変異体)を発現させたところ、発現細胞は伸長し、アクチンストレス線維、微小管の細胞の長軸方向に沿って走行しているが認められた。このような微小管の走行に不可欠なmDiaの領域を決定したところ、mDiaのC末端側のFH2領域であることが判明した。この結果は、mDiaによるアクチン細胞骨格の再編成と微小管の配向とがmDiaの異なる領域を介していることを示唆するものである。

Low molecular weight G protein Rho mediates cellular migration and subsequent regulation of cellular invasion and migration Rho is expected to provide vital information on the understanding of cellular biological properties and the understanding of cellular pathways. The main research results of this year are: (1)Rho-Rac interaction;(2) Rho-labeled protein mDia, ROCK microtube alignment, stabilization and stability. (1)Swiss 3T3 cells in serum starvation state were stimulated by high concentration of glucose and glucose, and the formation of cell adhesion spots was observed. C3 enzyme pretreatment, structure formation ROCK Inhibitor Y-27632 is used to inhibit cell adhesion, cell adhesion, and membrane ruffilng. The ruffling of Rac's dominant negative body appears in the following way: The result is that the Rho Rac is the only one who can show the existence of a network. The protein mDia is related to Rho and Cas. (2) Some of the mDia in HeLa cells were inactivated and some of the mDia cells were elongated, and some of the mDia cells were activated and some of the mDia cells were elongated. The path of the microtube cannot be determined by the field of mDia, and the field of fH2 on the C-terminal side can be determined by the field of mDia. The results showed that the reorganization of mDia cells, the alignment of microtubes, and the formation of mDia cells in different regions were all related.